[发明专利]小麦骨干种质周8425B特异性染色体片段检测的分子标记及其应用

权利要求书

1.小麦骨干种质周8425B特异性染色体片段检测的分子标记，其特征在于，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.用以扩增权利要求1所述的小麦骨干种质周8425B特异性染色体片段检测的分子标记的引物对在检测小麦植株是否有周8425B特异的1BL/1RS易位片段中应用，其特征在于，所述引物对为：Z84-1B-1F：5′- TCCAGGACTCCCTCAAC -3′；Z84-1B-1R：5′-AGGCGATGGATAGTCTAAT -3′。

3.权利要求1所述小麦骨干种质周8425B特异性染色体片段检测的分子标记在检测小麦植株是否有周8425B特异的1BL/1RS易位片段中应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，检测步骤为：以小麦植株叶片或籽粒DNA为模板，以Z84-1B-1F和Z84-1B-1R所示序列为引物对进行PCR扩增，将扩增产物进行质量分数为8%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，若电泳产物存在大小为207bp的DNA片段，则说明该样品携带有所述的周8425B特异的1BL/1RS易位，预测该小麦植株对白粉病、条锈病、叶锈病抗性良好；所述Z84-1B-1F：5′- TCCAGGACTCCCTCAAC -3′；Z84-1B-1R：5′- AGGCGATGGATAGTCTAAT-3′。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述PCR反应体系为10 μL体系，组成为：2×Hieff™ PCR Master Mix 5 μL，10 μmol/L的ZH84-1B-1 F和ZH84-1B-1R引物各0.5 μL，50ng/μL的小麦样品DNA 1.0 μL，3 μL的ddH₂O；

PCR扩增程序为：94℃预变性5 min；94℃变性30 s、52℃退火30 s和72℃延伸30S，40个循环；最后72℃延伸5 min，获得扩增产物。

6.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述质量分数为8%聚丙烯酰胺凝胶电泳是指100 mL聚丙烯酰胺胶溶液中含有7.7 g丙烯酰胺和0.3g甲叉双丙烯酰胺。

7.如权利要求3～6任一项所述的应用，其特征在于，所述小麦植株是指小麦骨干种质周8425B、或以周8425B为父本与其它小麦品种杂交后回交得到的BC₁群体。