[发明专利]一株防治荔枝霜疫病的内生生防菌株HN075及其应用

说明书

本发明公开了一株防治荔枝霜疫病的内生生防菌株HN075及其应用。所述的生防菌株为芽孢杆菌(Bacillus spp.)HN075，已于2020年11月30日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏，菌株保藏号为CGMCC No.21270。该菌株对荔枝霜疫病表现出较好的防治效果。该生防菌株芽孢杆菌HN075是从荔枝叶片体内分离获得，属于内生生防菌，无毒、无致病性，与环境相容性好，因此在荔枝霜疫病的生物防治中具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于农作物病害防治技术领域，具体涉及一株防治荔枝霜疫病的内生生防菌株HN075及其应用。

背景技术

由荔枝霜疫霉(Peronophythora litchii Chen ex Ko et al)引起的荔枝霜疫病严重威胁着我国荔枝产业的健康发展，是荔枝生产及采后危害最为严重、影响最为广泛的病害。该病可以侵染嫩叶、嫩枝、花穗及果实，引起大量花穗和果实腐烂，一般年份可造成10％-30％的产量损失，流行年份可造成80％的产量损失，在广东、广西、福建，海南等地发生尤为严重，严重影响我国荔枝产业发展，造成重大的经济损失。

目前缺乏抗荔枝霜疫病的品种，防治该病的主要还是依赖使用化学药剂，其中栽培抗病品种是防治该病最经济、最有效、最简便的方法，但是在短时间内选育出抗荔枝霜疫病的新品种是非常困难的。农药对农业的发展虽然起着重要的作用，但随着社会的发展，伴随化学农药引起的安全及环境问题也日益凸显。使用化学农药不仅缺乏长期的有效性，而且对食品和环境的污染，对人类健康潜在的危害、对非靶标生物的影响以及导致病原菌抗药性产生等问题，现已受到越来越多的质疑。因此，生物防治尤其是拮抗微生物的利用受到普遍关注和重视，探索有效的生防途径无疑有着重大的理论意义和实用价值。

芽孢杆菌(Bacillus spp.)是土壤和植物微生态区系的优势生物种群，具有很高的抗逆能力和抗菌防病作用。芽孢杆菌不仅可以在土壤、植物根际体表等外界环境中广泛存在，而且是植物体内常见内生细菌，尤其是在植物的根、茎部。目前该菌已经在水稻、大豆、棉花、小麦、辣椒、番茄、玉米等农作物上显示出很好的病害防治效果。由于枯草芽孢杆菌具有生长快、营养简单以及产生耐热、抗逆芽孢等突出特征，而使其不仅有利于生防菌剂在生产、剂型加工及在环境中的存活、定殖与繁殖，并且批量生产工艺简单，成本较低，施用方便，储存期长，现已成为一种理想的生防细菌。许多性状优良的天然分离株已成功应用于植物病害的生物防治。芽孢杆菌通过成功定殖至植物根际、体表或体内，与病原菌竞争植物周围的营养，分泌抗菌物质以抑制病原菌生长，同时诱导植物防御系统抵御病原菌入侵，从而达到生防的目的。其主要防治对象为丝状真菌及卵菌所引起的植物病害。芽孢杆菌是一种嗜温、好氧、产芽孢的杆状细菌，其生理特征多样，分布广泛，极易分离培养。该菌在自然界中广泛存在，对人畜无毒无害，不污染环境，能产生多种抗菌素和酶，具有极强的抗逆能力。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明针对目前荔枝霜疫病严重发生，且面积逐年扩大，化学防治造成环境污染的问题，提供一株防治荔枝霜疫病的内生生防菌株HN075及其应用。

本发明技术方案主要包括以下内容：

一株防治荔枝霜疫病的内生生防菌株HN075，经形态观察、培养特征观察和分子生物学研究鉴定为芽孢杆菌(Bacillus spp.)，已于2020年11月30月保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，菌种保藏号为CGMCC No.21270。

本发明还提供了由所述内生生防菌株HN075发酵制成的生防菌剂，其制备方法如下：

将内生生防菌株HN075的种子液接种于发酵培养基中进行发酵得发酵液，将发酵液离心后过滤，即得所述生防菌剂；发酵条件为：接种量5％(v/v)，发酵培养基pH值7.0～7.2，培养温度37℃，摇床转速180r/min，培养时间48h。