[发明专利]线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针

权利要求书

1.线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针，其特征在于：靶向线粒体，对过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应，所述双响应荧光探针的化学结构式为：

双响应荧光探针发射波长可达745nm；与ONOO^-作用后，745nm处的荧光强度减弱，406nm处的荧光急剧增强；与HSO₃^-作用，745nm处的荧光强度减弱，580nm处的荧光增强。

2.一种权利要求1所述的线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针的制备方法，其特征在于：在氮气保护下，将间二乙氨基苯酚、氢化钠溶于N,N-二甲基甲酰胺中，室温下搅拌进行第一次反应，得到一次反应液；然后将近红外染料IR-780溶于N,N-二甲基甲酰胺中，加热进行第二次反应，得到二次反应液；将二次反应液加入到一次反应液中浓缩，再经柱层析分离得到化合物NI，即为过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针；所述间二乙氨基苯酚、氢化钠与近红外染料IR-780的质量比为5:0.73:10。

3.根据权利要求2所述的线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针的制备方法，其特征在于：所述第一次反应的反应温度为10～30℃，反应时间为5～20min。

4.根据权利要求2所述的线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针的制备方法，其特征在于：所述第二次反应的反应温度为30～100℃，反应时间为2～10h。

5.根据权利要求2所述的线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针的制备方法，其特征在于：所述柱层析用洗脱剂是体积比为100～10:1的二氯甲烷与甲醇的混合物。

6.一种制备权利要求1所述的线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针的应用，其特征在于：利用荧光检测分析法检测HSO₃^-和ONOO^-。

7.根据权利要求6所述的线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针的应用，其特征在于：将探针溶于DMSO中制备5mM探针母液；测定时，将探针母液加入不同当量的HSO₃^-或ONOO^-，用pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液稀释后，作用2～30min后进行荧光光谱测定，观察其在不同发射波长处的荧光强度变化。