[发明专利]环境响应型透明质酸-鬼臼毒素前药胶束及其制备方法和应用

权利要求书

1.环境响应型透明质酸-鬼臼毒素的前药胶束的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(1)将乙二胺或胱胺二盐酸盐溶在二甲基亚砜中，之后加入溶液1，在25℃下反应24-48小时；反应结束后，将所得混合物放入透析袋中用去离子水透析，再过滤、冻干，获得HA-NH₂或HA-S-S-NH₂固体；

所述溶液1的制备方法为：将透明质酸(HA)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)溶解在PBS溶液中，冰浴条件下反应1-2小时，获得溶液1；

(2)将琥珀酸酐、鬼臼毒素(PPT)和4-二甲氨基吡啶溶在甲苯中，在105-110℃条件下回流48-72小时，去除溶剂，干燥，获得羧基化的PPT固体(PPT-COOH)；

(3)将HA-NH₂或HA-S-S-NH₂固体溶在PBS溶液中，之后加入溶液2，在25℃下反应24-48小时；反应结束后，将所得混合物放入透析袋中用去离子水透析，再过滤、冻干，获得HA-NH-CO-PPT或HA-S-S-PP固体；

所述溶液2的制备方法为：将PPT-COOH、EDC和NHS溶在N,N-二甲基甲酰胺中，冰浴条件下反应1-2小时，获得溶液2；

(4)将HA-NH-CO-PPT或HA-S-S-PP固体溶解在超纯水中，超声处理10-20分钟，静置3-6小时，即得HA-NH-CO-PPT或HA-S-S-PPT前药胶束。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的HA分子量为3000-10000Da；步骤(1)和(3)中，所述的PBS溶液的pH为8.0。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)和(3)中，将所得混合物放入透析袋中用去离子水透析48-72小时，每3-12小时更换去离子水；所述透析袋的截留分子量为1000-2000Da。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的HA、EDC和NHS的摩尔比为1:0.5:0.5-1:1:1；所述的HA与乙二胺的摩尔比为1:0.5-1:2；所述的HA与胱胺二盐酸盐的摩尔比为1:0.5-1:5。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的PPT、SA和DMAP的摩尔比为1:1:1-10:15:1。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的PPT-COOH、EDC和NHS摩尔比为1:0.5:0.5-1:1:1；所述的HA-NH₂或HA-S-S-NH₂和PPT-COOH摩尔比为1:0.5-1:30。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的HA-NH-CO-PPT前药胶束为pH敏感的透明质酸-鬼臼毒素前药胶束，所述的HA-S-S-PPT前药胶束为pH、还原双敏感的透明质酸-鬼臼毒素前药胶束。

8.权利要求1-7中任意一项所述的方法制备得到的环境响应型透明质酸-鬼臼毒素前药胶束。

9.权利要求8所述的环境响应型透明质酸-鬼臼毒素前药胶束在制备治疗癌症药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述癌症为乳腺癌、肺癌或肝癌。