[发明专利]一种胍基丁胺的制备方法在审
申请号: | 202111162018.8 | 申请日: | 2021-09-30 |
公开(公告)号: | CN114058651A | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
发明(设计)人: | 岳明瑞;谢沛;曹华杰;郭永胜 | 申请(专利权)人: | 新泰市佳禾生物科技有限公司;汕头市佳禾生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P13/00 | 分类号: | C12P13/00;C12N9/88;C12N11/14;C07C277/08 |
代理公司: | 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 | 代理人: | 李茜 |
地址: | 271200 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胍基丁胺 制备 方法 | ||
1.一种胍基丁胺的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将含有精氨酸脱羧酶的发酵液调pH值至4.2~4.6,再依次经活性炭脱色和陶瓷膜过滤,得到滤液,滤液用镍柱进行亲和层析,再将精氨酸浆液加入到镍柱中,然后分次加入PLP,控制镍柱中液体的pH值为4.8~5.2,收集镍柱中流出的液体,即为胍基丁胺转化液;
(2)胍基丁胺转化液进行过膜、第一次脱色、电渗析、第一次浓缩、第一次分离得到胍基丁胺粗品;粗品再经重溶、第二次脱色、第二次浓缩、搅拌养晶、第二次分离得到胍基丁胺精品,最后干燥得到固体胍基丁胺。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,发酵液调pH值至4.4;陶瓷膜的孔径为100nm,压力0.5MPa;滤液亲和层析使用、50mM的PBS作为结合缓冲液。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述精氨酸浆液的制备方法为:将L-精氨酸加入纯水中,加入30wt%浓盐酸调pH到5.5-6.0,降温至38℃,得到精氨酸浆液;所述精氨酸浆液的浓度为300g/L。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述精氨酸浆液的流速为50cm/h;所述PLP的加入量为精氨酸浆液的0.03-0.04wt%。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述过膜是将胍基丁胺转化液通过抽滤依次经过硅藻土铺成的铺层和活性炭层铺成的铺层;所述活性炭的用量占胍基丁胺转化液的0.5wt%,所述硅藻土的用量占胍基丁胺转化液的0.5wt%。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述第一次脱色为:用活性炭在75℃下脱色40min;所述活性炭的用量为胍基丁胺转化液的1.5wt%。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述电渗析的pH控制在5.7~6.1,温度控制在40℃以下;淡室电导≤1000μs/cm时停止电渗析,将淡水放出;第一次浓缩是将电渗析放出的淡水通过旋转蒸发浓缩至400~450g/L。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述重溶为:粗品按照150g/L重溶,重溶温度60℃;所述第二次脱色为:将重溶液加入5~10wt‰的活性炭,60℃脱色30min得到脱色液,脱色液抽滤,使滤液的透光度达到98%以上;所述第二次浓缩为滤液旋转蒸发浓缩至400~450g/L。
9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述搅拌养晶为:搅拌下于常温结晶。
10.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,第一次分离时,粗品用0.5~1倍粗品体积的纯水洗涤,水洗液回流至第一次脱色重复使用;第二次分离时,搅拌养晶得到的精品用1~2倍精品体积的纯水洗涤,水洗液回流至第一次脱色重复使用。
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