[发明专利]一种病理组织切片染色试剂盒

说明书

一种病理组织切片染色试剂盒，属于病理学组织切片染色领域，包括切片脱蜡液、转换液、清洗液、分化液、返蓝液、苏木精染色液、伊红染色液和封片剂；本发明提供了一种成分简单、效果良好、毒性低、新型的病理组织切片染色试剂盒及制备方法，主要用于病理组织HE染色。本发明的特征在于1、减少二甲苯、酒精等传统染色试剂对操作者的危害；2、减少对环境的污染；3、染色过程不需要额外去离子水引入；4、分化液和返蓝液采用缓冲体系设计，作用更温和，HE染色的着色效果更清晰、鲜明；5、与传统苏木素配方相比，本试剂盒引入β‑环糊精以中和碘酸钠还原后产物碘，增加了染液的染色能力，同时引入还原剂二丁羟基甲苯，增加染液的使用寿命和保质期。

技术领域

本发明属于病理学组织切片染色领域，具体地说是一种病理组织切片染色试剂盒。

背景技术

在诸如组织病理学和微生物学的生命学科中，通常使用显微镜(例如光学显微镜)检验样本，这种方法需要将样本安置在载玻片上，经过染色后，使用玻璃盖玻片加以粘合剂进行封片。在病理学检查中通常使用苏木精伊红染色方法(HE)对组织样本进行着色。HE染色是将组织切片经过脱蜡、水化、苏木精染色、水洗、分化、水洗、返蓝、水洗、伊红染色、脱水、透明和封片等复杂繁琐的步骤，使组织细胞中的不同成分染成不同深浅的颜色，增强不同成分间的对比度，从而便于病理医生在光学显微镜下进行观察和研究。

在常规HE染色过程中，使用二甲苯进行脱蜡和后续的透明封固处理，对操作者伤害很大；水化和脱水过程使用梯度酒精等易挥发、易燃化学品；分化液通常使用盐酸酒精分化，盐酸的使用一方面增加了分化的控制难度，另一方面对于前处理欠佳的组织切片极易在分化过程中发生掉片而影响诊断和造成交叉污染；返蓝液常使用氨水溶液，氨水原液因储存和厂家不同，浓度略有差异，这造成配制的返蓝液浓度差异问题，易引起批间差；在苏木精染色液配制过程中，为加速苏木精向苏木因转化，往往使用化学氧化剂，如氧化汞、双氧水和碘酸钠，但化学氧化剂的使用通常会产生无效的反应产物如氧化苏木因和复合的聚合物沉淀，这种方法配制的苏木素染色液比自然成熟的埃里希苏木精(Ehrlich’shematoxylin)失效的更快，而造成染液有效期短，着色效果差，细胞核上色不鲜明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种病理切片染色试剂盒，用以解决现有技术中的缺陷，保证均一的HE染色效果。

本发明通过以下技术方案予以实现：

一种病理组织切片染色试剂盒，包括切片脱蜡液、转换液、清洗液、分化液、返蓝液、苏木精染色液、伊红染色液和封片剂；

所述的切片脱蜡液包括以下质量体积份数(即固体以重量计算，液体以体积计算，二者换算比为g/ml)的组分：溶剂油70-90份、中长链烷烃10-30份；

所述的转换液包括以下质量体积份数的组分：二丙二醇甲醚50份和丙二醇甲醚醋酸酯50份；

所述的清洗液包括以下质量体积份数的组分：去离子水70份、表面活性剂0.01-0.02份和乙二醇30份；

所述的分化液包括以下质量体积份数的组分：去离子水70份、乙二醇30份、冰醋酸0.3-0.5份和乙酸钠0.05份；

所述的返蓝液包括以下质量体积份数的组分：去离子水70份、乙二醇30份、三羟甲基氨基甲烷1.21份和浓度为0.1mol/L盐酸2.8份；

所述的苏木精染色液包括以下质量体积份数的组分：去离子水75份、乙二醇25份、苏木素0.6份、碘酸钠0.06份、硫酸铝2.67份、二丁基羟基甲苯0.2份、环糊精0.1份和冰醋酸4份；

所述的伊红染色液包括一下质量份数的组分：去离子水50份、乙二醇50份、水溶性伊红0.1份、冰醋酸0.9份和乙酸钠0.3份；其中伊红染色液的pH值为4.5；

所述的封片剂为柠檬油精封片剂或环保封片剂其中的任意一种。