[发明专利]一种芽孢杆菌碱性蛋白酶抑制肽的生物合成方法在审
| 申请号： | 202111163155.3 | 申请日： | 2021-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN113861266A | 公开（公告）日： | 2021-12-31 |
| 发明（设计）人： | 路福平;王洪彬;李奕鸣;邹晓桐 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C07K5/103 | 分类号： | C07K5/103;C12N15/70;C12N15/62;C12P21/02;C07K1/14;C07K1/113;C12P21/06;C07K1/34 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 黄淑娟 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 芽孢 杆菌 碱性 蛋白酶 抑制 生物 合成 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种芽孢杆菌碱性蛋白酶抑制肽AAPF(丙氨酸-丙氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸)的生物合成方法，其步骤特征如下：
(1)人工设计AAPF多重人工序列，序列中含有10-30个AAPF短序列，并在其重复序列之间的部分间隔中插入亲水性氨基酸组成的短序列，以降低整个人工序列的疏水性；
(2)构建AAPF多重人工序列的表达质粒和工程菌株，发酵合成AAPF多重人工序列的多肽分子；
(3)糜蛋白酶水解和超滤纯化制备获得AAPF短肽；
(4)AAPF短肽经氨基端酰基化修饰和羧基醛基化修饰获得芽孢杆菌碱性蛋白酶抑制肽。
2.如权利要求1所述的表达质粒，优选地，选择pET22b(+)或者pPIC9k质粒。
3.如权利要求1所述的工程菌株，优选地，选择大肠杆菌或者毕赤酵母作为工程菌株。
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