[发明专利]一种长链脂肪酸甘油醇类化合物Rubracin B、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种长链脂肪酸甘油醇类化合物Rubracin B，其特征在于：结构如下式所示：

2.根据权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于：所述化合物由红棕毛筒腔菌发酵提取后获得，所述红棕毛筒腔菌命名为红棕毛筒腔菌Tubeufia rubra PF02-2，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2019957。

3.根据权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：将红棕毛筒腔菌Tubeufia rubra PF02-2进行液体或固体发酵培养，得到发酵物；将发酵物萃取，所得萃取物经分离纯化，得到长链脂肪酸甘油醇类化合物Rubracin B。

4.根据权利要求3所述化合物的制备方法，其特征在于：具体包括以下步骤：

S1、菌株活化：取出保存的菌种，接种在基础培养基平板上，静置培养传代至第三代后放大培养；

S2、发酵培养：取步骤S1活化后的菌种接种在固体培养基中，在26～30℃下静置发酵培养一段时间；

S3、萃取：取菌体连同培养基，加入乙酸乙酯萃取，将萃取液浓缩后得到发酵产物；

S4、发酵产物预处理：用氯:甲＝1:1溶剂溶解发酵产物，再与硅胶按质量比1:1～2混合均匀，待溶剂挥发后作为一次上柱样品，再与硅胶粉和石油醚上分离柱，分别采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和甲醇依次梯度洗脱，洗脱溶剂经旋转蒸发仪减压回收后，用氯仿、丙酮或甲醇溶解，在用薄层层析点板，使用展开剂展开，选择在紫外可见光分析仪下254nm或365nm有荧光的液体，再用8％硫酸乙醇香草醛显色剂显色；合并乙酸乙酯层溶剂洗脱液，回收乙酸乙酯溶剂，得到乙酸乙酯浸膏；

S5、纯化分离：a、将乙酸乙酯浸膏用甲醇溶剂溶解，与硅胶按质量比1:1～3混合均匀，待溶剂挥发作上柱样品上预柱，采用10％甲醇水进行平衡反相中压柱，加入含样品预柱，采用甲醇水依次10个梯度洗脱，洗脱液经旋转蒸发仪回收溶剂后，甲醇溶解后在用薄层层析点板，使用展开剂展开，选择在紫外可见光分析仪下254nm或365nm有荧光的液体，再合并8％硫酸乙醇香草醛显色剂显灰黑色的组分，得到Fr.12组分；

b、将组分Fr.12用甲醇溶剂溶解后，与硅胶按质量比1:1～3混合均匀，待溶剂挥发后作上柱样品；称取硅胶粉与氯:甲＝1:1溶剂混合均匀装入分离柱中，再加入柱样品，采用用氯:甲:甲酸＝9:1:1滴梯度洗脱，洗脱液经旋转蒸发仪回收溶剂后，甲醇溶解后在用薄层层析点板，使用展开剂展开，选择在紫外可见光分析仪下254nm或365nm有荧光的液体，再合并8％硫酸乙醇香草醛显色剂显灰黑色的组分，得到Fr.12-5组分；

c、将Fr.12-5用甲醇溶解，与硅胶按质量比1:1～3混合均匀，待溶剂挥发后作上柱样品上预柱，采用50％甲醇水进行平衡反相中压柱，加入含样品预柱，采用甲醇水依次6个梯度洗脱，洗脱液经旋转蒸发仪回收溶剂后，甲醇溶解后在用薄层层析点板，使用展开剂展开，选择在紫外可见光分析仪下254nm或365nm有荧光的液体，再合并8％硫酸乙醇香草醛显色剂显灰黑色的组分，得到Fr.12-5-4组分；

d、将Fr.12-5-4采用正相硅胶柱层析，采用氯:甲系统梯度洗脱，薄层层析点板合并得到化合物Rubracin B。

5.根据权利要求4所述化合物的制备方法，其特征在于：步骤S2的固体培养基为燕麦培养基，将200g燕麦以及150mL双蒸水混合后获得。

6.一种权利要求1所述的化合物在制备肿瘤耐药逆转剂或肿瘤药物增敏剂中的应用，其特征在于：肿瘤药物为阿霉素，肿瘤为乳腺癌。