[发明专利]好氧脱氮菌种及其菌剂制备与应用

权利要求书

1.一种净化水体的菌剂，其特征在于：所述菌剂含不动杆菌YTLJ-N-S10和芽孢杆菌YTLJ-N-B38，其中不动杆菌YTLJ-N-S10和芽孢杆菌YTLJ-N-B38按10-20：1-10质量比混合，菌剂总有效活菌数≥1.0×10⁹个/mL；

所述不动杆菌YTLJ-N-S10保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为中国广州，保藏日期为2021年7月5日，保藏编号为GDMCC No：61690，分类命名为Acinetobacter sp. ；

所述芽孢杆菌YTLJ-N-B38保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为中国广州，保藏日期为2021年7月5日，保藏编号为GDMCC No：61774，分类命名为Bacillus sp. 。

2.按权利要求1所述的净化水体的菌剂，其特征在于：净化水体的菌剂为不动杆菌YTLJ-N-S10和芽孢杆菌YTLJ-N-B38再与好氧脱氮菌胞外多糖粗品和辅料混合制备而成；

辅料为按质量比100-200：1-10：1-10将富氮生物炭、红糖和蛋白胨混合获得；

所述富氮生物炭泛指氮含量高于1%的各类生物炭。

3.按权利要求2所述的净化水体的菌剂，其特征在于：所述好氧脱氮菌胞外多糖粗品为不动杆菌YTLJ-N-S10扩繁培养滤液经醇沉后分泌获得。

4.权利要求1-3任意一项所述的净化水体的菌剂制备方法，其特征在于：

1）菌种扩繁：将不动杆菌YTLJ-N-S10和芽孢杆菌YTLJ-N-B38分别接种至含抗生素的扩繁培养基中，于温度28℃下培养48-72小时，分离收集沉淀细菌；

2）复合菌干粉制备：将扩繁获得的不动杆菌YTLJ-N-S10和芽孢杆菌YTLJ-N-B38单一菌通过冷冻干燥，粉碎分别获得单一菌株干粉，而后不动杆菌干粉与芽孢杆菌按10-20: 1-10质量比混合；

3）好氧脱氮菌胞外多糖粗品制备：向上述不动杆菌YTLJ-N-S10扩繁培养液分离获得滤液中加入其2-4倍体积的95%乙醇，静置让胞外多糖充分沉淀，而后洗涤即得好氧脱氮菌胞外多糖粗品，干燥待用；

4）复合菌剂制备：

（1）将制得复合菌干粉与好氧脱氮菌胞外多糖粗品混合获得混合物，混合比例为100：0.1-1质量比；

（2）按质量比100-200：1-10：1-10将富氮生物炭、红糖和蛋白胨混合获得辅料；辅料按照1-10%的比例添加入上述步骤（1）所得混合物中，即得复合菌剂；所述富氮生物炭泛指氮含量高于1%的各类生物炭。

5.按权利要求4所述的净化水体的菌剂的制备方法，其特征在于：所述含抗生素的扩繁培养基中抗生素的添加量为扩繁培养基质量的0.01-0.05%；

所述扩繁培养基为3-5% K₂HPO₄·3H₂O、1-3% NaCl、1-3% MgSO₄·7H₂O、0.05-0.5%NH₄NO₄、0.01-0.04% MnSO₄·H₂O、0.01-0.05% FeSO₄·7H₂O，0.5-1.5%琥珀酸钠、0.01-0.1%NaNO₂、0.001-0.005% (NH₄)₂MoO₄、0.001-0.005% CoCl₂、0.001-0.005% Y(NO₃)₃；

所述抗生素为四环素类抗生素、磺胺类抗生素、喹诺酮类抗生素和大环内酯类抗生素的混合物，抗生素的质量比为1：1：1：1。

6.一种权利要求1所述净化水体的菌剂的应用，其特征在于：所述菌剂通过去除水体中氮素并去除有机污染物的方式在净化水体中的应用。