[发明专利]一种异化金属还原菌自驱动同步生物芬顿降解有机污染物的方法

权利要求书

1.一种异化金属还原菌自驱动同步生物芬顿降解有机污染物的方法，其特征在于，兼性好氧的异化金属还原菌通过有氧呼吸自身产生H₂O₂，同时在有氧条件下通过还原途径实现细胞外Fe(Ⅲ)还原生成Fe(Ⅱ)，继而活化体系中的H₂O₂产生高反应活性的羟基自由基•OH，从而氧化降解体系中的有机污染物；

所述兼性好氧的异化金属还原菌选自Shewanella oneidensis MR-1野生型，菌株编号是ATCC 700550™；

所述有机污染物选自偶氮染料、三苯甲烷染料或者多环芳烃。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述Fe(Ⅲ)源选自柠檬酸铁、Fe₂SO₄、针铁矿、水铁矿或者磁铁矿。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤如下：

（1）配置含有10 mM乳酸和含有5 mg/L罗丹明B废水的矿物盐培养基，使用50 mL血清瓶分装30 mL降解体系，用透气膜封口，灭菌备用；再将针铁矿以终浓度0.5 g/L添加到矿物盐培养基中；

（2）将保存在甘油中的Shewanella oneidensis MR-1划线于LB平板上，30℃过夜培养；

（3）用无菌牙签挑取活化好的单菌落，接种于50 mL的LB液体培养基中，于30℃和200rpm转速条件下震荡培养至对数后期；

（4）在4℃下，以5000 rpm的转速离心5分钟收集菌体细胞，之后用磷酸盐缓冲溶液重悬洗涤两次，制成菌悬液备用；

（5）在超净台中，将步骤（4）所得到的菌悬液以终浓度1×10⁷细胞/毫升添加到装有等量培养基的血清瓶中进行污染物降解；

（6）30℃培养箱培养，定时取样，罗丹明B的浓度直接根据其在554 nm的吸光值来计算；

（7）直至污染物罗丹明B降解完全。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤如下：

（1）配置含有10 mM乳酸和5 mM柠檬酸铁的矿物盐培养基，使用50 mL血清瓶分装30 mL降解体系，用透气膜封口，灭菌备用；

（2）将保存在甘油中的Shewanella oneidensis MR-1划线于LB平板上，30℃过夜培养；

（3）用无菌牙签挑取活化好的单菌落，接种于50 mL的LB液体培养基中，于30℃和200rpm转速条件下震荡培养至对数后期；

（4）在4℃下，以5000 rpm的转速离心5分钟收集菌体细胞，之后用磷酸盐缓冲溶液重悬洗涤两次，制成菌悬液备用；

（5）在超净台中，将步骤（4）所得到的菌悬液以终浓度1×10⁷细胞/毫升，含终浓度5 mM的1,4-二氧六环废水添加到装有等量培养基的血清瓶中进行污染物降解；

（6）30℃培养箱培养，定时取样，1,4-二氧六环的浓度是由高效液相色谱法测定，其分离柱为Hypersil GOLD^TM-C18色谱柱，柱温25℃，流动相为95%水和5%乙腈，流速1 mL/min，使用紫外可见检测器，检测波长为190 nm；

（7）直至污染物1,4-二氧六环降解完全。