[发明专利]一种耐盐节杆菌及其固氮应用

说明书

本发明涉及一种耐盐节杆菌及其应用，属于微生物学和环境保护技术领域，其分类命名为耐盐节杆菌株(Arthrobacter pascens)，保藏编号为CGMCC No.20974；保藏日为2020年10月29日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)。本发明的耐盐节杆菌的固氮能力强且持久，可使Ashby无氮培养基中凯氏氮含量上升，可使土壤速效氮含量上升15.6％；用于缺氮土壤中，将空气中游离的氮元素、土壤中其他形式的氮元素转化为速效氮，提高土壤肥力；可施用于过量施加化肥的土壤中，将其他形式的氮转化为易被利用的速效氮，对土壤进行生物修复，降低化肥施用量；可制备成生物菌肥，作为对提土壤肥力的深度强化处理手段，方法简单，运行及维护成本较低，在绿色农业的发展中具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种耐盐节杆菌及其固氮应用，属于微生物学和环境保护技术领域。

背景技术

氮元素是植物生长最重要的营养元素之一。目前，我国农业想要提高氮含量，主要通过施用化肥。但由于农业技术滞后，及不当的化肥施用方法，导致化肥利用率低，在多雨或灌溉较为频繁地区，速效氮会随雨水或灌溉用水流失。不仅流失率极高，含大量含氮污水流入水体也是富营养化的一大成因。

由于化肥的过度施用，会导致土壤污染、有毒物质积累，导致土壤生物群落改变，对土壤有益的动物种类、数量减少，致使土壤板结，团粒结构遭到破坏，营养物质分解不充分，破坏了土壤生态结构，致使微生物驱系恶化、酶活性下降、病原菌增多。导致土壤肥力下降，进而化肥使用量被迫增多，形成恶性循环。不仅加重了农业生产成本，也造成了资源的极大浪费，更加剧了一系列环境问题。

因此，从自然界中筛选出有较强固氮能力的菌株，从而将其制成生物菌制剂，应用于提高土壤氮含量，将有实际的应用价值，成为该技术领域需要解决的技术难题。

发明内容

本发明的目的之一是针对上述现有技术存在的问题，提供一种能高效固氮的耐盐节杆菌株。

本发明的上述目的是通过以下技术方案达到的：

一种耐盐节杆菌，其分类命名为耐盐节杆菌株(Arthrobacter pascens)，保藏编号为CGMCC No.20974；保藏日为2020年10月29日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路，中国科学院微生物研究所。

本发明的另一目的是提供上述耐盐节杆菌的培养方法。

本发明的上述目的是通过以下技术方案达到的：

一种耐盐节杆菌菌株的培养方法，其步骤如下：

(1)、培养基的制备

Ashby无氮培养基：甘露醇10g，KH₂PO₄ 0.2g，MgSO₄·7H₂O 0.2g，NaCl 0.2g，CaSO₄·2H₂O 0.1g，CaCO₃ 5.0g，蒸馏水1.0L；，在121℃下，恒温灭菌20分钟；

固体Ashby无氮培养基：甘露醇10g，KH₂PO₄ 0.2g，MgSO₄·7H₂O 0.2g，NaCl 0.2g，CaSO₄·2H₂O 0.1g，CaCO₃ 5.0g，琼脂15g，蒸馏水1.0L；在121℃下，恒温灭菌20分钟；

(2)、第一代培养

称取土壤样品，放入装有适量玻璃珠和无菌水的锥形瓶中，静置，在振荡培养箱中振荡，制成菌悬液母液；