[发明专利]一种荧光-拉曼双模式的纳米传感器及其制备方法与其在硫醇检测中的应用

权利要求书

1.一种用于定量或定性检测硫醇的荧光-拉曼双模式的纳米传感器，其特征在于，所述纳米传感器包括功能化的DNA链1、与所述功能化的DNA链1互补配对的功能化的DNA链2以及金纳米花AuNFs；所述功能化的DNA链1与AuNFs通过巯基进行连接；

所述功能化的DNA链1的核酸序列为5’-SH-AAAAAAAATAGTTTCTACTATCCAGCCTCGAGCGA-3’；

所述功能化的DNA链2的核酸序列为5’-TCGCTCGAGGCTGGA/HS-SH/GGAAACTATAAA-荧光基团-3’；所述荧光基团选自Cy5、Cy5.5、Cy3或ROX。

2.如权利要求1中所述的用于定量或定性检测硫醇的荧光-拉曼双模式的纳米传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：将DNA链1与所述AuNFs溶液混合孵育，并加入氯化盐的水溶液进行反应，反应结束后向反应液中加入表面配体继续反应，待反应结束后进行固液分离并取固相，将所得固相重悬于缓冲液中，并加入细胞穿透肽TAT进行反应，得到经DNA链1功能化的AuNFs溶液；所述表面配体为甲氧基聚乙二醇硫醇、羧基聚乙二醇硫醇、氨基聚乙二醇硫醇、聚乙二醇硫醇和牛血清白蛋白中的一种或多种；

S2：将S1中所述经DNA链1功能化的AuNFs溶液与所述功能化的DNA链2溶液混合孵育，得到所述纳米传感器。

3.根据权利要求2中所述的制备方法，其特征在于，S1中，所述氯化盐选自氯化锂、氯化钾、氯化镁和氯化钠中的一种或多种。

4.如权利要求1所述的纳米传感器在定量或定性检测硫醇中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述纳米传感器在检测细胞中硫醇的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，检测细胞内硫醇的方法包括以下步骤：使用含有毒素的基础培养基1对细胞进行培养，去掉所述基础培养基1并用缓冲液清洗，加入含有所述纳米传感器的基础培养基2共培养0.5~1.5h，去掉所述基础培养基2并清洗，检测细胞的拉曼信号值和荧光信号值；所述基础培养基1或基础培养基2选自DMEM高糖基本培养基或RPMI-1640基本培养基。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述基础培养基2中所述纳米传感器的浓度为0.5-3nM。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述细胞包括人宫颈癌细胞Hela、人结直肠腺癌细胞Caco-2、人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞QSG-7701中的一种或多种。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述毒素选自T-2毒素、黄曲霉毒素B1、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素中的一种或多种。