[发明专利]一种生物土壤结皮层中土壤微塑料的定量分析方法

权利要求书

1.一种生物土壤结皮层中土壤微塑料的定量分析方法，包括以下步骤：

a、样品的采集与处理-

雨后或用超纯水湿润生物土壤结皮层，采用铝制或者玻璃制的环刀采集生物土壤结皮层，土壤样品采集后于阴凉避光处干燥，干燥后放置在4℃避光处恒温储存备用；

b、逐级稀释

湿润生物土壤结皮层风干后，称取2.5g生物土壤结皮层样品，加入250ml锥形瓶中，加入100ml去离子水与5ml植物油（玉米胚芽油），手动振荡1min后静置30min；

待沉积物完全沉到瓶底，取锥形瓶中油层以及水层上清液，倒入附有微孔滤膜的抽滤漏斗中进行抽滤，抽滤过程中使用2-3ml无水乙醇冲洗抽滤漏斗、微孔滤膜以及玻璃棒，将冲洗液倒入锥形瓶中；重新取2-3ml无水乙醇，再次冲洗，直到抽滤漏斗和玻璃棒上没有油状液滴为止，滤液在锥形瓶中重新静置并分层；

将得到的油层溶液加入玉米胚芽油进行稀释，定容至25ml；从定容后的溶液中取出12.5ml加入25ml容量瓶中，并定容至25ml,重复此步骤3次，形成3个稀释等级，则为1、2、3级浓度，每级浓度分别是上一级浓度的二分之一，最终得到3级浓度的样品；

c、加热探针

定量取第3级稀释等级的提取液滴在载玻片上，在显微镜下进行观察，使用140℃的高温探针进行加热，记录形态结构发生变化的物体数量，通过换算，形态结构发生变化的物体数量，定容25ml/载玻片滴液体积，8个/2.5g即为生物土壤结皮层中微塑料含量。