[发明专利]孔蛋白单体的突变体、蛋白孔及其应用

权利要求书

1.一种孔蛋白单体的突变体，其中所述孔蛋白单体的突变体的氨基酸包括SEQ ID NO:1所示的序列或与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％或50％同一性的序列，并且所述孔蛋白单体的突变体的氨基酸包括在对应SEQ ID NO:1的S79、S80、和F81的一个或多个位置处的突变。

2.根据权利要求1所述的孔蛋白单体的突变体，所述孔蛋白单体的突变体的氨基酸包括在对应SEQ ID NO:1的76-81、76-220、69-81、69-85、69-220、79-81、或79-220的一个或多个位置处的突变。

3.根据权利要求1或2所述的孔蛋白单体的突变体，所述孔蛋白单体的突变体的氨基酸包括：

(1)对应SEQ ID NO:1的I76、S79、S80、和F81的一个或多个位置处具有氨基酸的插入、缺失和/或替换；(2)对应SEQ ID NO:1的Q69、I76、S79、S80、F81、D136、和E220的一个或多个位置处具有氨基酸的插入、缺失和/或替换；或(3)对应SEQ ID NO:1的S79、S80、和F81的一个或多个位置处具有氨基酸的插入、缺失和/或替换。

4.根据前述权利要求任一项所述的孔蛋白单体的突变体，其中所述SEQ ID NO:1所示的序列来源于Simiduia agarivorans。

5.根据前述权利要求任一项所述的孔蛋白单体的突变体，其中所述孔蛋白单体的突变体的氨基酸突变选自以下：

(a)对应SEQ ID NO:1的I76突变为F、Y、W中的0至3种；S79突变为G、A、V、L、I中的0至5种；S80突变为G、A、V、L、I中的0至5种；F81突变为F、Y、W中的0至3种；

(b)对应SEQ ID NO:1的Q69突变为G、A、V、L、I中的0至5种；I76突变为F、Y、W中的0至3种；S79突变为N、E、D、Q中的0至4种；S80突变为G、A、V、L、I中的0至5种；F81突变为F、Y、W中的0至3种；D136突变为K、H、R中的0至3种；E220突变为G、A、V、L、I中的0至5种；和

(c)对应SEQ ID NO:1的S79突变为G、A、V、L、I中的0至5种；S80突变为G、A、V、L、I中的0至5种；F81突变为F、Y、W中的0至3种。

6.根据前述权利要求任一项所述的孔蛋白单体的突变体，其中所述孔蛋白单体的突变体的氨基酸突变选自以下：

(a)对应SEQ ID NO:1的I76Y、S79V、S80A、和F81缺失；

(b)对应SEQ ID NO:1的Q69L、I76Y、S79N、S80A、F81缺失、D136K、和E220I；

(c)对应SEQ ID NO:1的I76Y、S79G、S80G、和F81缺失；和

(d)对应SEQ ID NO:1的S79V、S80A和F81缺失。

7.根据前述权利要求任一项所述的孔蛋白单体的突变体，其中所述孔蛋白单体的突变体的氨基酸序列包括SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、或SEQ ID NO:19，或由其组成。