[发明专利]一种脆弱拟杆菌灭活菌粉及其制备方法

权利要求书

1.一种脆弱拟杆菌灭活菌粉，其特征在于，其中包括脆弱拟杆菌灭活菌；所述脆弱拟杆菌灭活菌的菌体包括完整的细胞形态结构；菌数达到1×10¹¹Cell/g以上。

2.根据权利要求1所述的脆弱拟杆菌灭活菌粉，其特征在于，所述脆弱拟杆菌灭活菌粉还包括辅料。

优选地，所述脆弱拟杆菌灭活菌粉中，所述脆弱拟杆菌灭活菌与所述辅料的质量比为1:(0.05-4)。

3.根据权利要求1或2所述的脆弱拟杆菌灭活菌粉，其特征在于，所述辅料包括赋形剂。优选地，所述辅料在室温下为固体。

优选地，所述赋形剂包括甘露醇、山梨醇、麦芽糊精、乳糖、氯化钠、麦芽糖、蔗糖、葡萄糖、海藻糖、右旋糖酐、脯氨酸、赖氨酸、丙氨酸、酪蛋白、脱脂乳中的至少一种或两种以上的组合。

优选地，所述赋形剂中包括氯化钠。

优选地，所述赋形剂中，氯化钠的质量分数为0-25wt％。

4.权利要求1-3任一项所述的脆弱拟杆菌灭活菌粉的制备方法，其特征在于，特别地，通过所述制备方法制得的脆弱拟杆菌灭活菌粉，其菌体细胞结构完整，所述制备方法包括以下步骤：

(1)取脆弱拟杆菌发酵培养；

(2)发酵培养结束后，对发酵液进行离心，收集菌体，按菌体与氯化钠水溶液的重量体积比为1g:(10～30)mL加入氯化钠水溶液洗涤、离心，得到洗涤后菌体；

(3)向洗涤后菌体中加入第一赋形剂溶液混合重悬得到菌体溶液，再进行灭活处理，离心，收集灭活菌泥；

(4)向步骤(3)获得的灭活菌泥中加入第二赋形剂溶液，得灭活菌原液；

(5)将步骤(4)获得的灭活菌原液干燥至残留水分低于5wt％，即得脆弱拟杆菌灭活菌粉。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，发酵液的菌数达到10⁸CFU/mL以上。

优选地，步骤(2)中，所述氯化钠水溶液的质量浓度为0.6-1.5wt％，优选为0.65-1.2wt％，更优选为0.8-1.0wt％，最优选0.85-0.95wt％，例如为0.9wt％的氯化钠水溶液。

6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述菌体与第一赋形剂溶液的重量体积比为1g:(5～40)mL。

优选地，步骤(3)中，所述第一赋形剂溶液中，赋形剂的质量分数为4～30wt％。

优选地，步骤(3)中，所述第一赋形剂溶液的溶剂选自权利要求5中所述的氯化钠水溶液。进一步优选地，所述第一赋形剂溶液的溶剂选自生理盐水，例如为0.9wt％的氯化钠水溶液。

7.根据权利要求4-6任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述灭活处理的方法选自热灭活、冷冻灭活或者化学灭活中的至少一种，优选为热灭活。

优选地，所述热灭活的温度为60～100℃，热灭活的时间为10～60min。

8.根据权利要求4-7任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，加入第二赋形剂溶液使灭活菌原液的总重量与步骤(3)灭活前的菌体溶液重量一致。优选地，所述第二赋形剂溶液与所述第一赋形剂溶液相同或不相同。

优选地，所述第二赋形剂溶液中，赋形剂的质量分数为4～30wt％。

优选地，所述第二赋形剂溶液的溶剂选自权利要求5中所述的氯化钠水溶液。进一步优选地，所述第二赋形剂溶液的溶剂选自生理盐水，例如为0.9wt％的氯化钠水溶液。

9.根据权利要求4-8任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述干燥的方式选自真空冷冻干燥和/或喷雾干燥，优选为真空冷冻干燥。

优选地，所述真空冷冻干燥的条件包括：冷冻温度为-20～-40℃，冷冻时间为1～3小时，真空度为0.20～0.25mbar。

10.一种药物制剂，其特征在于，所述药物制剂含有权利要求1-3任一项所述的脆弱拟杆菌灭活菌粉。

优选地，所述药物制剂选自经口给药制剂、灌肠剂或凝胶剂中的至少一种或两种以上的组合。