[发明专利]一种秋茄DNA指纹图谱的构建及应用在审

专利信息
申请号: 202111192639.0 申请日: 2021-10-13
公开(公告)号: CN113862389A 公开(公告)日: 2021-12-31
发明(设计)人: 刘星;王金旺;杨升;魏馨;卢翔;李效文;陈秋夏 申请(专利权)人: 浙江省亚热带作物研究所
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;G16B5/00
代理公司: 北京蕙识同联专利代理事务所(特殊普通合伙) 11966 代理人: 赵雪
地址: 325000 浙江省*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 dna 指纹 图谱 构建 应用
【权利要求书】:

1.一种秋茄InDel分子标记的引物,其特征在于,所述引物为14对引物:第1对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.1所示,下游引物序列如SEQ ID.NO.2所示;第2对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.3所示,下游引物序列如SEQ ID.NO.4所示;第3对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.5所示,下游引物序列如SEQ ID.NO.6所示;第4对引物,上游引物序列如SEQID.NO.7所示,下游引物序列如SEQ ID.NO.8所示;第5对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.9所示,下游引物序列如SEQ ID.NO.10所示;第6对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.11所示,下游引物序列如SEQ ID.NO.12所示;第7对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.13所示,下游引物序列如SEQ ID.NO.14所示;第8对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.15所示,下游引物序列如SEQ ID.NO.16所示;第9对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.17所示,下游引物序列如SEQ ID.NO.18所示;第10对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.19所示,下游引物序列如SEQ ID.NO.20所示;第11对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.21所示,下游引物序列如SEQID.NO.22所示;第12对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.23所示,下游引物序列如SEQID.NO.24所示;第13对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.25所示,下游引物序列如SEQID.NO.26所示;第14对引物,上游引物序列如SEQ ID.NO.27所示,下游引物序列如SEQID.NO.28所示。

2.一种鉴定秋茄品种的试剂盒,其特征在于:包含权利要求1所述的InDel分子标记引物。

3.一种构建权利要求1所述引物的方法,包括如下步骤:收集秋茄基因组的信息,然后判断缺失或插入位点是否为InDel标记,根据判断后确认的InDel标记构建特异性引物;其中,所述判断方法包括采用如下的算法:假设有两条序列S=″AATCGTTA″,T=″ATCGA″,规定打分规则为1、match=6;2、mismatch=-2;3、gap_open=-6;4、gap_extend=-3;对于序列S上i位置与序列T上j位置的比对得分设为:

1)初始化

构造(|S|+1)×(|T|+1)阶矩阵V,设置初始条件为:

V(i,0)=0,0≤i≤|S|

V(0,j)=0,0≤j≤|T|

2)填充

填充规则如下:

其中表示该元素的值来源于上方领域的元素,表示该元素的值来源于左边领域的元素,这两种形式表示有空位的插入,V(i,j)有三种来源:V(i-1,j-1)、V(i-1,j)、V(i,j-1);

3)回溯

从V(|S|,|T|)开始回溯过程,追溯其到前驱元素之间的路径(对角、垂直或水平方向),到V(0,0)为止,得到序列最优全局比对的路径。

4.一种判断秋茄InDel标记的方法,包括采用如下的算法:假设有两条序列S=″AATCGTTA″,T=″ATCGA″,规定打分规则为1、match=6;2、mismatch=-2;3、gap_open=-6;4、gap_extend=-3;对于序列S上i位置与序列T上j位置的比对得分设为:

1)初始化

构造(|S|+1)×(|T|+1)阶矩阵V,设置初始条件为:

V(i,0)=0,0≤i≤|S|

V(0,j)=0,0≤j≤|T|

2)填充

填充规则如下:

其中表示该元素的值来源于上方领域的元素,表示该元素的值来源于左边领域的元素,这两种形式表示有空位的插入,V(i,j)有三种来源:V(i-1,j-1)、V(i-1,j)、V(i,j-1);

3)回溯

从V(|S|,|T|)开始回溯过程,追溯其到前驱元素之间的路径(对角、垂直或水平方向),到V(0,0)为止,得到序列最优全局比对的路径。

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