[发明专利]用于检测人淀粉样蛋白-β和磷酸化Tau蛋白的胶体金免疫层析试纸及其制备方法

说明书

本发明属于生物技术领域，公开了一种用于检测人淀粉样蛋白‑β和磷酸化Tau蛋白的胶体金免疫层析试纸及其制备方法，该试纸包括底板、重叠设置在该底板上的吸水垫、层析膜、结合物释放垫和样品垫，结合物释放垫上包被有胶体金标记的单克隆抗体1F12，3G5；层析膜上的第一检测线包被有单克隆抗体1F12，第二检测线包被有单克隆抗体2C6，第三检测线包被有单克隆抗体4B1，质控线包被有羊抗鼠IgG抗体。本发明通过对试纸的细节组成等进行改进，得到能够检测不同形式人淀粉样蛋白‑β，如人淀粉样蛋白‑β单体、寡聚体，和磷酸化Tau蛋白，填补了当前检测领域基于胶体金试纸条实现同时检测人淀粉样蛋白‑β单体，寡聚体蛋白和磷酸化Tau蛋白的空白。

技术领域

本发明属于生物技术领域，更具体地，涉及一种用于检测人淀粉样蛋白-β和磷酸化Tau蛋白的胶体金免疫层析试纸及其制备方法，该试纸利用双抗体夹心检测抗原的原理，能够用于检测不同形式人淀粉样蛋白-β，包括人淀粉样蛋白-β单体(human amyloid betapeptide(1-42)Monomers,hAβ₄₂Ms)、人淀粉样蛋白-β寡聚体(human amyloid beta peptide(1-42)Oligomers,hAβ₄₂Os)和人磷酸化Tau蛋白(hp-Tau^396,404)，该试纸及基于该试纸构成的试剂盒能够应用于检测，实现快速、灵敏的检测。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，简称AD)是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病。临床上以记忆障碍、失语、失用、失认、视空间技能损害、执行功能障碍以及人格和行为改变等全面性痴呆表现为特征。当前，痴呆已成为老年人的常见病，其中AD痴呆占60％～80％，是老年人失能和死亡的主要原因。截至2020年，中国阿尔茨海默病每年新发患者超过100万例，阿尔茨海默病总患者人数超过1000万例，10年复合增长率达到4％。而这一增长在中国城市人口中尤为显著，10年复合增长率将达到6％。目前，我国是全球AD患者数量最多的国家，AD患者数居世界第一，占世界AD患者总人口的1/4，而这个数字还在随人口老龄化攀升。根据国际阿尔茨海默病协会的报告显示，每3秒钟，全球就有一位AD患者产生，我国每年平均有30万新发病例。我国80岁以上的老年群体中，有11.4％的老人患有AD，并且60岁以上妇女患老年痴呆的概率通常是同年龄段男性的2到3倍。而且痴呆并不只发生在老年，早发型AD患者可能在四五十岁就出现症状，被定义为世界上第一位AD患者的女性奥古斯特·德特尔就只有51岁。

相比庞大的患病人群，公众认知程度低、患者就诊率低、缺少创新且有效的治疗手段、家庭及社会照护成本高等，成为我国阿尔茨海默病的现状。面对这样一个吞噬记忆的疾病，我们的应对方案却乏善可陈。AD防治是一个世界性难题，首要原因在于难以早期诊断。AD患病的病理特征包括含有淀粉样肽beta的斑块和含有Tau的神经纤维缠结(NFTs)。