[发明专利]一种重组蛋白质药物的分子设计

权利要求书

1.提高血管内皮抑制素或其变体的抗新生血管生成活性的方法，包括提高血管内皮抑制素或其变体的ATPase活性。

2.权利要求1的方法，包括对血管内皮抑制素或其变体的A基序和/或B基序和/或C基序进行基因工程改造，从而获得具有提高的ATPase活性的血管内皮抑制素突变体。

3.权利要求2的方法，其中所述基因工程改造包括以下手段中的一种或多种：(1)保持对应于SEQ ID NO:1中A基序GXXGXXK中的保守氨基酸残基G89、G92、K95不发生改变；(2)通过调整A基序GXXGXXK中的可变残基X，使A基序对应肽段的空间构象柔性增加；(3)在A基序经典序列GXXGXXK中的K95残基之后插入一个Ser或者Thr；(4)根据A基序的改变，对B基序做出相应调整；(5)对C基序的氨基酸残基进行部分或全部突变；(6)根据B基序的改变，对C基序做出相应调整；(7)根据A基序的改变，对C基序做出相应调整；(8)同时改变A、B和C三个基序。

4.权利要求2或3的方法，其中B基序被保持不变。

5.权利要求1-4任一项的方法，其中所述血管内皮抑制素突变体是人血管内皮抑制素的突变体。

6.权利要求1-3任一项的方法，其中所述血管内皮抑制素突变体具有选自由SEQ IDNO:3-34以及SEQ ID NO:37-39构成的组的序列。

7.权利要求1-3任一项的方法，其中所述血管内皮抑制素突变体具有选自下组的序列：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30。

8.血管内皮抑制素或其变体的突变体，所述突变体具有提高的抗新生血管生成的活性，其中所述突变体在其ATP结合基序包含突变，且与相应的野生型血管内皮抑制素或其变体相比，所述突变体的ATPase活性提高。

9.权利要求8的突变体，其中与相应的野生型血管内皮抑制素或其变体相比，所述突变体的ATPase活性提高至少大约100％。

10.权利要求8的突变体，其中与相应的野生型血管内皮抑制素或其变体相比，所述突变体的ATPase活性提高至少大约200％。

11.权利要求8的突变体，其中与相应的野生型血管内皮抑制素或其变体相比，所述突变体的ATPase活性提高至少大约300％。

12.权利要求8的突变体，其中所述突变体在相应于由SEQ ID NO:1的第89-95位氨基酸残基组成的Gly-Ser-Glu-Gly-Pro-Leu-Lys基序的序列中包含突变，其中所述突变选自一或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加或其组合，其中所述突变导致所述突变体的ATPase活性提高。

13.权利要求12的突变体，其中所述突变体的相应于由SEQ ID NO:1的第89-95位氨基酸残基组成的Gly-Ser-Glu-Gly-Pro-Leu-Lys基序的序列被部分或全部缺失。

14.权利要求12的突变体，其中所述突变体的相应于SEQ ID NO:1的第89、92和95位氨基酸残基中的一或多个氨基酸残基被取代或缺失。