[发明专利]与黑色素瘤相关的生物标志物及其在诊疗中的应用

说明书

本发明公开了与黑色素瘤相关的生物标志物及其在诊疗中的应用，所述生物标志物包括miR‑155、miR‑27b‑5p、miR‑450a，本发明提供了用于黑色素瘤诊断的芯片、试剂盒，本发明通过细胞功能验证实验证明了所述生物标志物miR‑155、miR‑27b‑5p、miR‑450a三者联合对于黑色素瘤的治疗具有协同的作用，能够应用于黑色素瘤的诊断和治疗中。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体地，本发明涉及与黑色素瘤相关的生物标志物及其在诊疗中的应用，更具体地，本发明涉及黑色素瘤相关的生物标志物包括miR-155、miR-27b-5p、miR-450a。

背景技术

黑色素瘤(Melanoma)是一种来源于表皮基底层黑色素细胞的高度恶性肿瘤，该肿瘤好发于皮肤或邻近皮肤的粘膜组织，黑色素瘤是最具侵袭性和致死性的皮肤癌，在过去的几十年里，黑色素瘤在全球的发病率和死亡率呈现急剧上升的趋势。然而，导致黑色素瘤患者死亡的主要原因是肿瘤易发生快速转移。黑色素瘤具有恶性程度高、进展迅速，转移早等特征，而且，近年来，免疫疗法和靶向治疗方法的飞速进展使得黑色素瘤的临床病史发生了革命性的变化，其治疗具有一定的效果，能够显著性地延长患者的生存期，但是这受限于临床的运用，并且对于已经出现了肿瘤转移的晚期黑色素瘤患者而言，目前仍然还没有令人满意的治疗方法。

目前，关于黑色素瘤的发病机制的研究还亟需进行进一步的深入探讨。越来越多的证据表明，黑色素瘤的病理形成涉及到多个基因、多个信号通路和基因调控的复杂变化。因此，鉴定黑色素瘤进展中的一些潜在的靶标分子，包括致癌基因和抑癌基因等，有望成为未来治疗黑色素瘤的新型靶点。微小核糖核酸(microRNA，miRNA)是一类长度约为19-24个核苷酸的内源性非编码RNA分子，miRNA可通过直接与其靶向调控基因的3’-非翻译区的互补序列结合而在转录后水平上调节基因的表达，从而最终导致靶标基因降解或翻译抑制。研究表明，单个miRNA可以调控超过100个基因的表达，同时，一个基因也可能被几个miRNA进行靶向调控。

目前，已有大量的miRNA已被注释，并预测大约有30％-40％的人类基因受到miRNA的调控。近年来，大量的研究显示，在多种实体癌症患者的肿瘤组织与其相对应的邻近肿瘤组织的正常组织之间存在miRNA表达谱的失调，这可能是miRNA的改变而诱发的表观遗传学改变、转录因子的活性改变或与miRNA生物发生相关的酶改变而造成的结果。此外，已有证据表明，异常miRNA的表达可通过下调肿瘤抑制基因或上调肿瘤促癌基因而促成许多癌症的发生、发展与进展。因此，miRNA被认为是黑色素瘤发展过程中的关键调控因子。

鉴于此，本发明通过筛选与黑色素瘤相关的miRNA，进而研究筛选得到的miRNA作为黑色素瘤的生物标志物在诊断和治疗黑色素瘤中的应用，为黑色素瘤提供新的生物标志物，也为治疗黑色素瘤提供了新的途径。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的在于提供与黑色素瘤相关的生物标志物及其在诊疗中的应用，所述黑色素瘤相关的生物标志物包括miR-155、miR-27b-5p、miR-450a，本发明提供了miRNA黑色素瘤诊断和治疗标志物组合、芯片、试剂盒，能够简单有效且无创地对黑色素瘤进行诊断，此外，所述miR-155、miR-27b-5p、miR-450a三者联合对黑色素瘤的治疗具有协同增效的作用。

本发明公开的生物标志物miR-155、miR-27b-5p、miR-450a的序列均可在miRBase数据库(http://microrna.sanger.ac.uk/)中进行查询，其中，miR-155的序列如SEQ IDNO:16所示，miR-27b-5p的序列如SEQ ID NO:17所示，miR-450a的序列如SEQ ID NO:18所示；

miR-155的序列：

CUGUUAAUGCUAAUCGUGAUAGGGGUUUUUGCCUCCAACUGACUCCUACAUAUUAGCAUUAACAG(SEQID NO:16)