[发明专利]一种促进油茶增殖及生根的方法及其应用

说明书

本发明提供了一种促进油茶增殖及生根的方法及其应用。本发明的方法在充分利用植物组织细胞的全能性和植物组织培养技术的基础上，经过外植体的腋芽诱导培养、增殖培养、生根培养等方面培养基配方的优化，结合方法过程的优化，有效提高了油茶的扩繁系数，获得生根良好且移栽成活率高的组培植物。油茶组培最大的困难是增值效率不高、生根质量不理想，难以获得根系发达的苗。而本发明解决了这些技术问题，使得移栽后的成活率大大提高，且这一方法适用于多种油茶的品种，具有一定的广适性。本发明提供了一条能够满足大规模工厂化育苗要求的有效快繁途径。

技术领域

本发明属于生物学和生物技术领域，更具体地，本发明涉及一种促进油茶增殖及生根的方法及其应用。

背景技术

油茶(Camellia spp)属山茶科(Theacae)山茶属(Camellia)常绿小乔木,是我国南方重要的木本食用油料树种，也称为油茶树。它生长在中国南方亚热带地区的高山及丘陵地带，主要集中在浙江、江西、河南、湖南、广西五省。油茶树是世界四大木本油料树木之一，油茶与油棕、油橄榄和椰子并称为世界四大木本食用油料植物，是中国特有的一种纯天然高级油料。油茶被誉为“东方橄榄油”，有“绿色油库”之美誉。茶油色清味香，营养丰富，耐贮藏，有降低血压、血脂和软化血管等作用，是优质食用油。茶油的不饱和脂肪酸含量高达90％，远远高于菜油、花生油和豆油，比橄榄油维生素E含量高一倍，并含有山茶甙等特定生理活性物质，具有极高的营养价值。油茶具有很高的综合利用价值，可作为润滑油、防锈油用于工业，副产品茶籽粕中含有茶皂素、茶籽多糖、蛋白等，茶饼既是农药，又是肥料，茶籽壳还可制成糠醛、活性炭等，它们都是化工、轻工、食品、饲料工业产品等的原料，再生物质能源中有很高的应用价值。油茶是一个抗污染能力极强的树种，对二氧化硫抗性强，抗氟和吸氯能力也很强。因此科学经营油茶林具有保持水土、涵养水源、调节气候的生态效益。

油茶长期以种子有性繁殖，引起了品种类型的变异与退化，这是油茶目前低产的重要原因之一。为保持良种的优良性状，目前主要采用插条或嫁接繁殖育苗，但缺点是扩繁系数低，周期长不能满足油茶产业发展对油茶优良无性系的需求。

本领域的油茶种植历史悠久，但在油茶组织培养研究方面进展缓慢。制约油茶工厂化育苗技术推广的主要瓶颈是组培苗扩增率低和生根以及移栽驯化难，不同的无性系扩繁和生根难易程度差别很大。这增加了组培方法优化的困难因素，找到一种合适的对于较多品种的油茶具有较好效果的组培方法，是本领域亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种促进油茶增殖及生根的方法及其应用。

在本发明的第一方面，提供一种促进油茶增殖及生根的方法，所述方法包括：(1)采集油茶枝条为外植体，获取带芽茎段，以腋芽诱导培养基诱导产生芽苗；所述腋芽诱导培养基包括：6-苄基腺嘌呤和萘乙酸；(2)将(1)获得的芽苗切成小芽，接种到增殖培养基中培养，获得经增殖的芽苗；所述增殖培养基包括：6-苄基腺嘌呤、玉米素、吲哚乙酸、精胺和维生素B2；(3)将(2)的经增殖的芽苗以吲哚丁酸诱导处理3～30分钟之后，接种到生根培养基中培养，获得生根的苗；所述生根培养基包括：多效唑。

在本发明的另一方面，提供一种培育油茶的方法，所述方法包括：(a)以前面所述的方法诱导，获得生根的苗；(b)将(a)的生根的苗进行炼苗，之后移栽到育苗基质中进行驯化；较佳地还包括将经驯化的植株移栽至自然环境中。

在一个或多个实施方式中，步骤(1)之前，还包括对油茶的外植体进行消毒；较佳地，采用洗衣粉水或洗洁精溶液清洗，之后以酒精浸泡，接着用次氯酸钠消毒。

在一个或多个实施方式中，油茶枝条剪切成带1～2个腋芽的小段；较佳地小段的长度1～4cm，如2、3cm。

在一个或多个实施方案中，每种溶液进行消毒后，均采用无菌水冲洗1～5次(如2、3、4次)或冲洗1～15分钟(如2、3、5、6、8、9、10、12分钟)。