[发明专利]转氨酶突变体及其应用有效
申请号: | 202111205863.9 | 申请日: | 2019-05-30 |
公开(公告)号: | CN113817702B | 公开(公告)日: | 2023-07-14 |
发明(设计)人: | 洪浩;詹姆斯·盖吉;张娜;刘芳;颜俊杰;刘冶;王祖建 | 申请(专利权)人: | 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N15/81;C12N1/21;C12N1/19;C12P17/10;C12P17/12;C12P13/00;C12R1/19 |
代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人: | 金田蕴 |
地址: | 300457 天津市滨*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转氨酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种转氨酶突变体,其特征在于,所述转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,所述突变为C60Y+F164V+F176Y、C60Y+F176S+F164V、C60Y+F164V、C60Y+F164V+A436P、C60Y+F164V+A436N、C60Y+F164V+A436Y、C60Y+F164V+A436Q或C60Y+F164V+A436E。
2.一种DNA分子,其特征在于,所述DNA分子编码权利要求1所述的转氨酶突变体。
3.一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒含有权利要求2所述的DNA分子。
4.根据权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒为pET-22a(+)、pET-22b(+)、pET-3a(+)、pET-3d(+)、pET-11a(+)、pET-12a(+)、pET-14b(+)、pET-15b(+)、pET-16b(+)、pET-17b(+)、pET-19b(+)、pET-20b(+)、pET-21a(+)、pET-23a(+)、pET-23b(+)、pET-24a(+)、pET-25b(+)、pET-26b(+)、pET-27b(+)、pET-28a(+)、pET-29a(+)、pET-30a(+)、pET-31b(+)、pET-32a(+)、pET-35b(+)、pET-38b(+)、pET-39b(+)、pET-40b(+)、pET-41a(+)、pET-41b(+)、pET-42a(+)、pET-43a(+)、pET-43b(+)、pET-44a(+)、pET-49b(+)、pQE2、pQE9、pQE30、pQE31、pQE32、pQE40、pQE70、pQE80、pRSET-A、pRSET-B、pRSET-C、pGEX-5X-1、pGEX-6p-1、pGEX-6p-2、pBV220、pBV221、pBV222、pTrc99A、pTwin1、pEZZ18、pKK232-18、pUC-18或pUC-19。
5.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞含有权利要求3或4所述的重组质粒。
6.根据权利要求5所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞包括原核细胞或真核细胞。
7.根据权利要求6所述的宿主细胞,其特征在于,所述原核细胞为大肠杆菌BL21-DE3细胞或大肠杆菌Rosetta-DE3细胞,所述真核细胞为酵母。
8.一种生产手性胺的方法,包括转氨酶对酮类化合物及氨基供体进行催化转氨基反应的步骤,其特征在于,所述转氨酶为权利要求1所述的转氨酶突变体。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述酮类化合物为转氨基反应产物为其中,R1和R2分别独立的表示任选取代或未被取代的烷基、任选取代或未被取代的芳烷基、或任选取代或未被取代的芳基;R1和R2可单独或两者互相结合形成取代或未被取代的环。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,R1和R2为碳原子数1~20的任选取代或未被取代的烷基、任选取代或未被取代的芳烷基、或任选取代或未被取代的芳基。
11.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,R1和R2为碳原子数1~10的任选取代或未被取代的烷基、任选取代或未被取代的芳烷基、或任选取代或未被取代的芳基。
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