[发明专利]一种检测霜霉威的试纸条及其应用有效
| 申请号： | 202111209541.1 | 申请日： | 2021-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN113759110B | 公开（公告）日： | 2023-08-08 |
| 发明（设计）人： | 王春琼;张燕;陈丹;曾彦波;秦世春;李苓;张轲;张晓伟;蔡洁云;孙浩巍;彭丽娟;龙杰;杨艺敏;张庆刚 | 申请（专利权）人： | 云南省烟草质量监督检测站 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543;G01N33/558;G01N33/577 |
| 代理公司： | 成都市鼎宏恒业知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 51248 | 代理人： | 陈康 |
| 地址： | 650000 云南*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 霜霉威 试纸 及其 应用 | ||
1.一种检测霜霉威的试纸条，包括样品吸收垫（1）、结合物释放垫（2）、反应膜（3）、吸水垫（4）和底板（7），其特征在于：所述反应膜（3）上包被有霜霉威半抗原-载体蛋白偶联物的检测线（5）和羊抗鼠抗抗体的质控线（6），所述结合物释放垫（2）喷涂有霜霉威单克隆抗体-胶体金标记物；
所述霜霉威半抗原的制备方法如下：
取霜霉威1.88g，加吡啶20ml溶解，加1，4-环已烷二异氰酸酯2.49g，加三乙胺1.3ml，加热80℃反应3h，停止反应，旋蒸，除去吡啶和三乙胺，得到红色油状物，加入v/v为1/15的乙醚与正己烷35ml重结晶，得到环己烷异氰酸酯-霜霉威半抗原产物1.13g，收率31.9%；
所述环己烷异氰酸酯-霜霉威半抗原的结构式为：。
2.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述样品吸收垫（1）、结合物释放垫（2）、反应膜（3）、吸水垫（4）依次粘贴在底板（7）上。
3.如权利要求1-2任一项所述的试纸条，其特征在于，所述结合物释放垫（2）1/3~1/2被覆盖于样品吸收垫下。
4.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述霜霉威半抗原-载体蛋白偶联物由霜霉威半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白或人血清白蛋白中的一种。
5.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述霜霉威单克隆抗体是以霜霉威半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，所述羊抗鼠抗抗体是将鼠源抗体免疫羊得到。
6.一种制备权利要求1-5任一项所述试纸条的方法，其包括以下步骤：
（1）制备喷涂有霜霉威单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；
（2）制备包被有霜霉威半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜；
（3）将步骤（1）和步骤（2）制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。
7.一种检测采后待烤烟叶或初烤烟叶中霜霉威残留的方法，其包括以下步骤：
步骤a、用权利要求1-5任一项所述的试纸条进行检测；
步骤b、分析检测结果。
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