[发明专利]抑制间充质干细胞复制性衰老的方法

说明书

本发明公开了抑制间充质干细胞复制性衰老的方法。hUC‑MSCs复制性衰老是体外培养过程不可避免的问题。本发明发现，提高FOSL1蛋白表达水平可以发挥抗hUC‑MSCs衰老的作用，环(酪氨酸‑缬氨酸)可能是以FOSL1蛋白为靶点抑制hUC‑MSCs复制性衰老，且不破坏hUC‑MSCs的干细胞特性。

技术领域

本发明属于干细胞领域，涉及干细胞培养，具体为抑制间充质干细胞复制性衰老的方法。

背景技术

间充质干细胞(MSCs)广泛存在于多种组织中，包括骨髓、脂肪、胎盘等。由于其能够自我更新及多向分化，并表现出旁分泌、免疫调节等多种功能，MSCs被认为是细胞治疗最具应用前景的种子细胞。目前MSCs疗法可以作为一种新兴疗法用于治疗骨/软骨疾病、肾病、糖尿病、神经系统疾病以及免疫性疾病。

人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)作为MSCs中一员，不仅具有高度自我更新能力和多向分化潜能，而且不存在伦理问题，应用前景广阔。

hUC-MSCs复制性衰老是hUC-MSCs体外培养过程不可避免的问题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供抑制间充质干细胞复制性衰老的方法。

本发明上述目的通过如下技术方案实现：

提高FOSL1蛋白表达水平用于间充质干细胞体培养抑制其复制性衰老的用途。SA-β-Gal染色试验中，与模型对照组相比，FOSL1低激活组、FOSL1高激活组阳性细胞率显著降低，且FOSL1高激活组阳性细胞率显著低于FOSL1低激活组阳性细胞率。

优选地，所述间充质干细胞为hUC-MSCs。

优选地，提高FOSL1蛋白表达水平的化合物包括环(酪氨酸-缬氨酸)。环(酪氨酸-缬氨酸)可能通过作用于靶点FOSL1蛋白抑制hUC-MSCs复制性衰老，且不破坏hUC-MSCs的干细胞特性。

有益效果：

hUC-MSCs复制性衰老是hUC-MSCs体外培养过程不可避免的问题。本发明发现，提高FOSL1蛋白表达水平可以发挥抗hUC-MSCs衰老的作用，环(酪氨酸-缬氨酸)可能正是以FOSL1蛋白为靶点抑制hUC-MSCs复制性衰老。

附图说明

图1中：(A)SA-β-Gal染色图；(B)westernblot图；(C)茜素红和油红O染色图。

具体实施方式

一、实验材料

青霉素/链霉素、胰蛋白酶购自美国Invitrogen公司，胎牛血清、DMEM/F12培养基购自美国Gibco公司，萤光素标记的单克隆抗体CD105、CD90、CD44、CD73、CD19、CD34、CD45、HLA-DR购自美国BioLegend。环(酪氨酸-缬氨酸)纯度98％，购自武汉天植生物技术有限公司。人脐带间充质干细胞成骨诱导分化培养基、人脐带间充质干细胞成脂诱导分化培养基购自深圳市伟通生物科技有限公司。

二、实验方法

1、hUC-MSCs的分离和培养