[发明专利]虫草素混合物及其有效分离方法和应用

说明书

本发明属于分离领域，具体涉及一种虫草素混合物及其有效分离方法和应用,有效分离方法包括下述步骤：（1）原料准备；（2）酶解；（3）粗提；（4）分离：在上述（3）所得粗提物与80‑90%体积分数的乙醇水溶液作夹带剂均匀混合，粗提物与夹带剂的质量比为1:10；平衡10‑30min后,进行动态萃取，得到虫草素混合物。本申请采用酶解与超临界萃取结合的方式对蛹虫草内的虫草素进行提取，由于使用的85%体积分数的乙醇水溶液作为夹带剂，因此大多数的虫草多糖以及都被残留粗提物中不会被萃取出来，从而使虫草素与虫草多糖形成有效的分离。由于虫草素为小分子功能物，其可以被应用于呼吸道雾化药物。

技术领域

本发明属于分离领域，具体涉及一种虫草素混合物及其有效分离方法和应用。

背景技术

蛹虫草是一种名贵的中药材，性平味甘，具有滋肺补肾、止血化痰的功效。近年来的研究结果表明，蛹虫草是冬虫夏草的重要人工替代品之一，其在降血脂，防治动脉硬化，保护心、脑组织，镇静催眠，增强巨噬细胞活性，抗癌、抗炎、抗菌、抗缺氧等方面具有良好功效。蛹虫草的功能性成分、药理药效作用与天然冬虫夏草基本一致，其子实体富含虫草素和虫草多糖等重要的生理活性成分。

据现代科学论证：虫草素是一种具有抗菌活性的核苷类物质，对多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用，能抑制癌细胞的生长，并有降血糖的作用；虫草多糖是一种高度分枝的半乳甘露聚糖，它能促进淋巴细胞转化，提高血清IgG 的抗体含量和机体的免疫功能，增强机体自身抗癌抑癌的能力。

目前，根据国内外公开专利报道，提取精制虫草素和虫草多糖的方法主要有水煮法、醇提法、超临界CO₂萃取法等。但是这些方法均面临得到的虫草素含量较低的缺陷。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的缺点，提供一种虫草素混合物及其有效分离方法和应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种虫草素混合物的有效分离方法，包括下述步骤：

（1）原料准备：选取干燥的蛹虫草，粉碎，过40-60目筛后，按蛹虫草与水的质量体积比为1:4加水，搅拌成浆液，搅拌速度3000转/分钟，用于酶解；

（2）酶解：将（1）所得的浆液升温高至50-55℃，投入0.3-0.5份复合酶，酶解2-3小时，然后升温至110℃保温10min，冷却至30℃，得到酶解液；所述的复合酶为纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的复配，质量比例为2:1:1；

（3）粗提：在反应系统温度-10至0℃条件下，使高压差连续式低温提取器加入50%体积浓度的乙醇水溶液对酶解液进行粗提得到粗提物；所述原料与乙醇水溶液的重量比为1:10;其中乙醇水溶液为碱性；

（4）分离：在步骤（3）所得粗提物以80-90%体积分数的乙醇水溶液作夹带剂与粗提物均匀混合，粗提物与夹带剂的质量比例为8-15:100，平衡10-30min后，进行动态萃取，在萃取釜压力15-60Mpa，萃取温度35-60℃，萃取时间0.5-5小时，分离釜压力5-30Mpa，分离釜温度10-50℃，分离时间0.5-5小时，同一流程中分离釜压力始终小于萃取釜压力，二氧化碳流量10-100L/h的条件下，减压分离，得到虫草素混合物。

步骤4）的具体步骤为：以85%体积比的乙醇水溶液作夹带剂与粗提物均匀混合，粗提物与夹带剂的质量比例为夹8-15:100，平衡20min后，进行动态萃取，在萃取釜压力30Mpa，萃取温度45℃，萃取时间2小时，分离釜压力15Mpa，分离釜温度30℃，分离时间2小时，同一流程中分离釜压力始终小于萃取釜压力，二氧化碳流量70L/h的条件下，减压分离，得到虫草素混合物。

步骤（3）的具体步骤压力循环过程为-20MPa，5min至0MPa，5min至10MPa，5min至0Mpa，5min至-20Mpa，5min为一循环，共循环10次，得到的提取液调节pH为中性到偏酸性，离心分离得到提取液，浓缩干燥得到粗提物。