[发明专利]CYP2C9突变体、其对应的核酸片段及应用

说明书

本发明属于生物学领域，涉及一种CYP2C9突变体。本发明的突变体具有SEQ ID NO.1所示的序列，该突变体对药物的代谢活性低于野生型，对个体化用药具有指导意义。本发明还提供对应于该突变体的核酸片段及其应用。

技术领域

本发明属于生物学领域，涉及一种CYP2C9突变体。

背景技术

患者对药物治疗的反应存在较大的个体差异，只有约50％-75％的患者对药物治疗干预反应充分，而其他患者要么缺乏疗效，要么遭受不良反应事件。药物治疗结果可被多种因素影响，如环境因素(共同用药、饮食、吸烟等)、生理因素(性别、年龄、伴生疾病等)和遗传因素，其中遗传变异可解释约20-30％的不同治疗结局。根据临床药物基因组学实施联盟(CPIC)发布的指南，目前已有118种基因被认为具有药物遗传学活性，如HLA、CYP、VKORC1等。

细胞色素P450(Cytochrome P450 proteins,CYP)是人体内主要的药物代谢酶，它们能催化代谢多种内源、外源物质，通过结构中存在的亚铁离子传递电子氧化异源物，增强异源物的水溶性使其更易排出体外。CPIC发布的被认为具有药物遗传学活性的基因中，包含多个CYP的亚家族，如CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6等，其中CYP2C9是CYP2亚家族中的重要成员，约占肝微粒体P450蛋白总量的20％，约有16％的临床药物经由CYP2C9代谢。已有研究表明，其编码基因CYP2C9的遗传多态性可显著改变CYP酶的药物代谢活性，进而影响药物的体内代谢情况，并导致可能的药物不良反应的发生，尤其是针对像华法林这类低治疗窗的药物时更为显著。

前期研究中，申请人针对中国汉族人群建立了国际范围内单一民族最大的CYP2C9等位基因遗传多态性数据库，共检测到14种已知等位基因，同时还发现了22种新的非同义突变，其中的21种被国际人类CYP等位基因命名委员会命名为新等位基因(CYP2C9*36-*56)。体外研究表明，这些新发现的变异体均会导致CYP2C9酶的药物代谢活性下降，提示携带这些等位基因的个体服用经由CYP2C9代谢的药物时，发生药物不良反应的概率可能会上升。然而这些仅是CYP2C9可能存在的变异体的一部分，前期针对大量人群的基因筛查研究表明，汉族人群中可能还存在许多未被发现的CYP2C9突变类型，因此，本领域需要发现并研究更多的CYP2C9突变体，为临床合理用药提供重要的科学依据。

发明内容

申请人对北京医院心内科513例京籍汉族住院患者开展了CYP2C9基因分型检测，发现了一种全新的CYP2C9突变类型，该突变体由单碱基突变引起。因此，本发明的目的是提供一种新的CYP2C9突变类型，并提供对应该突变体的核酸片段及其应用。

本发明的第一个方面是提供一种CYP2C9突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。与野生型CYP2C9的氨基酸序列相比，该突变体存在Q214H突变。

第二个方面，提供对应于所述CYP2C9突变体的核酸片段，所述核酸片段包含对应于SEQ ID NO.2的第501位的突变位点，且是SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列中的至少10个连续核苷酸，其中第501位的核苷酸是T；或者所述核酸片段包含对应于SEQ ID NO.3的第642位的突变位点，且是SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列中的至少10个连续核苷酸，其中第642位的核苷酸是T；或者为上述核酸片段的互补序列片段。

第三个方面，提供用于检测和/或分析单碱基突变的引物，所述单碱基突变对应于SEQ ID NO.2的第501位或对应于SEQ ID NO.3的第642位，所述引物能够扩增所述单碱基突变。

第四个方面，提供用于检测和/或分析单碱基突变的试剂盒，所述试剂盒包括本发明的引物。

第五个方面，提供本发明的核酸片段在制备用作检测CYP2CP基因突变的检验标志物或制剂中的应用。