[发明专利]水稻GS2基因的荧光分子标记引物组及应用

权利要求书

1.水稻GS2基因的荧光分子标记引物组，其特征在于，所述荧光分子标记引物组由如下三条引物构成：

GS2-Fat：GAAGGTGACCAAGTTCATGCTCGTTTCCACAGGCTTTCTTTT；

GS2-Fca：GAAGGTCGGAGTCAACGGATTCGTTTCCACAGGCTTTCTTGA；

GS2-R：GATTCCAAGTACTGCGAGCG；

GS2-Fat的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，GS2-Fca的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，GS2-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.权利要求1所述的荧光分子标记引物组在制备用于选育或鉴定大粒水稻的试剂盒中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，利用所述试剂盒选育水稻大粒恢复系的方法如下：

S1：利用水稻GS2基因的荧光分子标记引物组从水稻种质资源中筛选鉴定出含有GS2基因的材料，将含有GS2基因的材料作为父本，与生产上主要应用的杂交水稻恢复系进行杂交，获得杂交F₁代种子；其中采用PCR扩增法进行筛选鉴定，并将PCR扩增产物在包含FAM、HEX和ROX三种荧光检测通道的酶标仪中进行快速检测，读取荧光强度信号值，将荧光信号值文件通过SNP decoder工具，结合标记信息，自动进行基因分型，获得基因型结果，根据基因型结果进行筛选；

S2：步骤S1中的F₁代自交获得F₂代，利用水稻GS2基因的荧光分子标记引物组从F₂代中选择含有目标基因的农艺性状优良的单株进行回交；

S3：连续回交两代后，进行多代自交，每代均结合农艺性状并利用水稻GS2基因的荧光分子标记引物组进行选择，获得稳定的含有GS2基因的株系后，与不育系进行测配。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述PCR扩增反应体系为10μL，具体如下：5μL包含2条通用荧光引物的2×PARMS master mix，0.15μL10mM GS2-Fat标记引物，0.15μL10mM GS2-Fca标记引物，0.4μL 10mM GS2-R通用反向引物，1μL模板DNA，3.3μL ddH₂O；所述PCR扩增反应程序如下：94℃，4min；然后10个循环94℃，20s，65℃，-0.8℃每循环，1min；然后32个循环94℃，20s，56℃，1min。