[发明专利]一种丛生北美冬青苗的快速培育方法

权利要求书

1.一种丛生北美冬青苗的快速培育方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)选材及消毒处理：选取生长健壮、无病虫害的1～2年生北美冬青枝条，摘除老叶，置于室温下水培7天，每天换水1次，以新长出的嫩茎作为外植体，然后将所选取的外植体剪切成2～4cm长的带芽茎段，经75％的乙醇浸泡0.3～0.6min，再用0.1％的升汞消毒6～10min，灭菌水冲洗4～6次；

(2)试管苗培养：在超净工作台上和无菌条件下，将步骤(1)中消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位，切成约1.0cm带芽茎段，接种在含有诱导培养基的培养瓶中，将其置于白色荧光灯为光源的环境下，控制光照强度为1800～2200Lux，设定光照时间14～18h·d^-1，温度25±1℃，培养30天，长成6～8cm的无菌试管苗；

(3)丛生增殖培养：将步骤(2)中长成的试管苗，剪切成长度为1.0～2.0cm带有1～2个腋芽的茎段，转接到增殖培养基中进行增殖培养，置于白色荧光灯光源下培养，控制光照强度为1800～2200Lux，设定光照时间14～18h·d^-1，温度25±1℃，每隔35d继代1次；在该培养基中同时可获得健壮的丛生增殖苗，增殖苗分枝数达到4以上；

(4)丛生瓶苗选择：选择长势良好的丛生增殖苗，高度在8～10cm，进行炼苗驯化；

(5)炼苗：先将北美冬青组培苗放置炼苗室，炼苗室以散射光为主，光照强度为3000～4000Lux，温度控制在15～25℃，培养5～7天后，打开瓶盖，在炼苗室继续培养2～3天；

(6)组培苗瓶外扦插：将丛生增殖苗整株从瓶内取出，洗净粘在植株基部的培养基，摘除底部发黄破损叶片，剪去丛生增殖苗发育不良或未伸长的分枝，只保留4或5个分枝；用刀在修整后的丛生增殖苗基部划出伤口，并在扦插前蘸取生根水，将基部插入生根基质中，其中扦插的基质选用泥炭；扦插过程中不时的喷洒水分，以保障组培苗不枯萎；

(7)扦插后管理：扦插完毕后浇透水，在幼苗上方覆盖薄膜，培养1～2周后撤膜，然后定期浇水、施叶面肥、喷杀菌剂，15～20d幼苗基部长出大量根系，25d后得到健壮的北美冬青丛生苗植株；培养结束后，直接将丛生苗移栽至营养钵内进行种植，成为北美冬青丛生苗产品。

2.根据权利要求1所述的丛生北美冬青苗的快速培育方法，其特征在于：所述的步骤(2)中诱导培养基为：WPM+0.2mg·L^-1 NAA+2.0mg·L^-1 6-BA+活性炭0.5g·L^-1，pH5.8。

3.根据权利要求1所述的丛生北美冬青苗的快速培育方法，其特征在于：所述的步骤(3)中增殖培养基为：WPM+2.5mg·L^-1BA+0.2mg·L^-1NAA+0.5g·L^-1活性碳，pH5.7。

4.根据权利要求1所述的丛生北美冬青苗的快速培育方法，其特征在于：所述的步骤(6)中生根水采用ABT生根粉1号，浓度为800～1000ppm，蘸取时间为3～5秒，浸泡组培苗基部1～2cm。

5.根据权利要求1所述的丛生北美冬青苗的快速培育方法，其特征在于：每升生根水溶液的配制方法：将500mg ABT生根粉1号用少量乙醇溶解，用清水定容至1L。

6.根据权利要求1所述的丛生北美冬青苗的快速培育方法，其特征在于：步骤(6)中扦插容器选用塑料育苗盘，基质占育苗盘3/4体积。

7.根据权利要求1所述的丛生北美冬青苗的快速培育方法，其特征在于：所述的步骤(6)中的泥炭用800倍多菌灵处理消毒；800倍的多菌灵为：取浓度50％的多菌灵1g用800mL的水稀释所得。

8.根据权利要求1所述的丛生北美冬青苗的快速培育方法，其特征在于：所述的步骤(7)培养温度控制在20～25℃，湿度保持85％以上，光强为2000～2500Lux，光照时间为16h/d。