[发明专利]一种高价值聚羟基脂肪酸酯的制备方法在审
申请号: | 202111231604.3 | 申请日: | 2021-10-22 |
公开(公告)号: | CN114250255A | 公开(公告)日: | 2022-03-29 |
发明(设计)人: | 张轶;杨鸣凤;邹雨琪;玛丽·哈德 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12P7/625 | 分类号: | C12P7/625 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 顾艳哲 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 价值 羟基 脂肪酸 制备 方法 | ||
1.一种高价值聚羟基脂肪酸酯的制备方法,其特征在于,将驯化的混合污泥、含有碳源、氮源、磷源的矿物盐培养基投入反应器,加入缓冲液使pH值维持在7以上,加入苯酚与氯酚后,不间断的进行曝气和搅拌,合成PHA。
2.根据权利要求1所述的一种高价值聚羟基脂肪酸酯的制备方法,其特征在于,所述的氯酚包括2-氯酚、3-氯酚、4-氯酚。
3.根据权利要求1所述的一种高价值聚羟基脂肪酸酯的制备方法,其特征在于,所述矿物盐培养基中以苯酚为碳源、以NH4Cl为氮源,以K2HPO4作为磷源。
4.根据权利要求3所述的一种高价值聚羟基脂肪酸酯的制备方法,其特征在于,所述苯酚的浓度为2400-2600mg L-1、NH4Cl的浓度为550-650mg L-1,所述K2HPO4的浓度为450-500mg L-1。
5.根据权利要求1所述的一种高价值聚羟基脂肪酸酯的制备方法,其特征在于,所述矿物盐培养基中加入包括MgSO4、CaCl2和FeSO4·7H2O的营养元素。
6.根据权利要求5所述的一种高价值聚羟基脂肪酸酯的制备方法,其特征在于,所述MgSO4、CaCl2和FeSO4·7H2O的浓度分别为90-95mg L-1、75-85mg L-1和170-190mg L-1。
7.根据权利要求5所述的一种高价值聚羟基脂肪酸酯的制备方法,其特征在于,所述缓冲液为NaHCO3。
8.根据权利要求1所述的一种高价值聚羟基脂肪酸酯的制备方法,其特征在于,所述驯化的混合污泥为能够将高浓度苯酚转化成胞内PHA的混合污泥。
9.根据权利要求1-8任意一项所述的一种高价值聚羟基脂肪酸酯的制备方法,其特征在于,所述苯酚的添加浓度为450-500mgL-1,所述氯酚的添加浓度为30-40mg L-1,并加入(NH4)2SO4、K2HPO4作为氮、磷源;MgSO4、FeSO4·7H2O、Ca(NO3)2作为营养元素;NaHCO3作为缓冲液维持pH,或根据需要加入一些微量元素。
10.根据权利要求9所述的一种高价值聚羟基脂肪酸酯的制备方法,其特征在于,将合成PHA后的污泥沉淀,去除上清液,将剩下的污泥离心,向沉淀中加入十二烷基硫酸钠并在恒温振荡器中孵育以破碎细胞,离心后收集沉淀,加入次氯酸钠,将混合物再次离心,残留的固体用去离子水洗涤,去除残留的SDS和NaClO,所得的粗PHA进一步用氯仿纯化,氯仿蒸发后剩余的膜状提取物即为PHA。
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