[发明专利]一种长吻鮠雄性性别特异性分子标记及其扩增引物和遗传性别鉴定方法

说明书

本发明公开了一种长吻鮠雄性性别特异性分子标记及其扩增引物和遗传性别鉴定方法。所述长吻鮠雄性特异性分子标记的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，其扩增引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。利用扩增引物对长吻鮠基因组DNA进行PCR扩增，产物进行电泳检测，若扩增出特异性条带，则长吻鮠鉴定为雄性个体，若未扩增出特异性目的条带，则为雌性个体，该遗传性别鉴定方法简单、快速、直接，且准确率高，对鱼体伤害小，不受长吻鮠发育时期的限制，解决了长吻鮠发育早期性别鉴定困难的难题，为生产上实现长吻鮠的性别控制育种具有重要意义。

技术领域

本发明属于DNA分子标记技术领域，具体涉及一种长吻鮠雄性性别特异性分子标记及其扩增引物和遗传性别鉴定方法。

背景技术

长吻鮠（Leiocassis longirostris Gunther）属于、鲶形目、鲿科、鮠属，俗称江团、肥沱，因其吻部较一般鱼长，故而学名是长吻鮠。长吻鮠主要分布于长江干支流和大型通江湖泊中，是一种名贵的淡水经济鱼类，其肉质细嫩、鲜美，无肌间刺且含肉率较高，鳔肥厚，素有“不吃江团，不知鱼味”的美称。由于环境恶化、资源锐减及人工捕捞等多方面因素影响，我国野生长吻鮠资源急剧衰竭，数量急剧减少。

长吻鮠雌雄个体生长存在显著差异，通常雄性个体的生长速度快于雌性，因此，培育长吻鮠雄性养殖群体具有商业化的生产价值。然而，长吻鮠的初次性成熟时间较长，需要3-5年，且在发育早期无法从形态外观上判断雌雄。传统的长吻鮠性别判断方法是通过观察生殖突，结合挤压腹部，观察是否有卵子或精子流出生殖孔，甚至很多时候需要通过解剖才能判定长吻鮠是否为雄性。特别是在长吻鮠的雄性腺发育早期，需要解剖观察性腺，甚至要利用组织切片手段，不仅造成了资源的浪费，还影响了长吻鮠的人工繁育和全雄品种的培育。因此，目前急需开发简单、便捷、准确的方法来鉴定长吻鮠的性别，进而加快全雄长吻鮠苗种培育的进程。

DNA分子标记已成为鉴定鱼类性别的重要工具，随着高通量测序技术的快速发展，测序技术已成为一种高效开发分子标记的方法。但目前关于长吻鮠性别鉴定相关的分子标记还未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种长吻鮠雄性性别特异性分子标记及其扩增引物和遗传性别鉴定方法。所述的长吻鮠雄性性别特异性分子标记解决了长吻鮠早期性别鉴定的难题，对开展长吻鮠性控育种具有重要意义，从而促进长吻鮠养殖产业的发展。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明提供了一种长吻鮠雄性性别特异性分子标记，所述长吻鮠雄性性别特异性分子标记的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

本发明还提供了所述的长吻鮠雄性性别特异性分子标记的扩增引物，所述扩增引物的序列为：

F：TAGGTTGATGACCCGCGACTGTCT；

R：TGTGGGAATGTTTTAAGAATCCTTAC。

本发明还提供了利用所述的长吻鮠雄性性别特异性分子标记的遗传性别鉴定方法，所述遗传性别鉴定方法包括以下步骤：

（1）提取待测的长吻鮠的基因组DNA；

（2）用所述长吻鮠雄性性别特异性分子标记的扩增引物对长吻鮠的基因组DNA进行PCR扩增，得到PCR产物；

（3）对PCR产物进行电泳检测，若扩增出特异性目的条带，待测长吻鮠为雄性个体，若未扩增出特异性目的条带，待测长吻鮠为雌性个体。

进一步的，所述特异性目的条带的大小为501 bp。