[发明专利]一种脂溶性抗生素生物发酵调控的方法

说明书

本发明公开了一种脂溶性抗生素生物发酵调控的方法，涉及微生物药物技术领域。本发明的脂溶性抗生素生物发酵调控的方法包括以下步骤：在脂溶性抗生素发酵过程中，向发酵液中加入脂溶性培养基，所述脂溶性培养基包括高碳醇或油脂。本发明设计科学，构思巧妙。本发明创造性地在脂溶性抗生素发酵过程中加入脂溶性培养基，其不仅能为菌株提供缓慢利用碳源，还可以溶解脂溶性目标产物，解除产物反馈抑制。并且，本发明采用脂溶性培养基溶解了目标产物，大大简化了后续的分离纯化过程，节省了生产成本。

技术领域

本发明涉及微生物药物技术领域，具体涉及一种脂溶性抗生素生物发酵调控的方法。

背景技术

脂溶性抗生素如西罗莫司(Sirolimus)、他克莫司(Tacrolimus)、多拉菌素(Doramectin)、多杀菌素(Spinosyn)和柱晶白霉素(Kitasamycin)等其结构上均属聚酮类物质，这类抗生素通常累积在微生物细胞内，只有少量存在于发酵液中。当微生物生物合成这些代谢产物达到一定浓度后就会产生反馈抑制，目标产物合成速度逐渐减慢或停止。为了解除抗生素的反馈抑制，可以采用多种方法。首选的方法是对产生菌进行菌种选育，得到具备抗生素耐受的高产菌株，该方法需投入大量的人力物力，还需要一些运气。其次，可以采用向发酵液中加入树脂，对产物进行吸附，从而解除反馈抑制，但树脂会对微生物菌丝产生损伤，还可能吸附营养成分影响代谢。

因此，提供一种脂溶性抗生素发酵方法，能解除产物反馈抑制，不会对微生物菌丝产生损伤，能促进目标产物大量合成，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种脂溶性抗生素生物发酵调控的方法，其工艺简单，操作简便，易于控制，能明显提高目标产物产量。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明提供的一种脂溶性抗生素生物发酵调控的方法，包括以下步骤：在脂溶性抗生素发酵过程中，向发酵液中加入脂溶性培养基，所述脂溶性培养基包括高碳醇或油脂。

申请人意外地发现，在菌株适应的情况下，向发酵液中加入高碳醇或油脂等不溶于水可以溶解脂溶性抗生素的培养基，其既可以作为缓慢利用碳源，用于促进菌株的生长，还能溶解脂溶性目标产物，解除产物反馈抑制，促进目标产物大量合成。此外，由于目标产物溶解到脂溶性培养基中，简化了后续分离纯化过程，节省了生产成本。

本发明的部分实施方案中，所述高碳醇为C8-C20的脂肪醇。

本发明的部分实施方案中，所述油脂为脂肪酸或其酯化物。

本发明的部分实施方案中，所述脂溶性抗生素包含西罗莫司(Sirolimus)、他克莫司(Tacrolimus)、阿维菌素(Avermectin)、多杀菌素(Spinosyn)和柱晶白霉素(Kitasamycin)。

本发明的部分实施方案中，脂溶性培养基的用量为发酵液质量的4.0％～15.0％。

本发明的部分实施方案中，脂溶性培养基分批加入发酵液中。

本发明的部分实施方案中，脂溶性培养基每批加入的量为发酵液质量的0.5～2％。

本发明的技术方案中，先通过基础培养基使得菌丝快速生长，在发酵中期或中后期开始加入脂溶性培养基。

本发明的一个实施例中，在阿维菌素产生菌发酵前期80小时内，通过基础培养基使得菌丝快速生长，80小时--315小时，每隔24小时补入发酵液质量1.0wt.％十二醇(月桂醇)。

本发明的一个实施例中，在西罗莫司产生菌发酵前期0-60小时，通过基础培养基使得菌丝快速生长；80小时-220小时，每隔24小时补入1.5％油酸甲酯。