[发明专利]一种葡萄霜霉菌分泌的植物免疫激活蛋白及引物和应用

说明书

本发明公开了一种葡萄霜霉菌分泌的植物免疫激活蛋白及引物和应用，该植物免疫激活蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，该植物免疫激活蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该植物免疫激活蛋白的突变体PvAvh77‑M2，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，突变体PvAvh77‑M2的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。该植物免疫激活蛋白的突变体PvAvh77‑M2能够诱导葡萄抗病相关基因的表达及防卫物质的积累，抑制葡萄霜霉菌的侵染，减轻霜霉菌对葡萄造成的危害，能够作为预防葡萄霜霉病的生物农药。

技术领域

本发明涉及一种植物免疫激活蛋白，具体涉及一种葡萄霜霉菌分泌的植物免疫激活蛋白及引物和应用。

背景技术

由葡萄霜霉菌[Plasmopara viticola(Berk.M.A.Curtis)Berl.De Toni]引起的葡萄霜霉病(Plasmopara viticola)是限制葡萄产业健康发展的最严重的真菌病害，传统高毒农药防治霜霉病给环境和人类健康带来严重威胁。2015年，农业农村部提出化肥农药零增长计划，因此，生物农药的开发和利用尤为重要。

在植物-病原菌共进化过程中，植物已进化出复杂而功能多样的先天免疫系统以抵御潜在病原菌的入侵。病原菌在侵染早期能够通过分泌毒性因子攻击植物，植物则利用细胞表面的模式识别受体(Pattern Recognition Recepters,PRRs)识别病原菌毒性因子，触发植物产生基础免疫反应。这些可以激发植物免疫反应的因子被称为植物免疫激发子(plant immune inducers)，即植物疫苗，主要包括植物免疫激活蛋白、寡糖、水杨酸(SalicylicAcid,SA)及其类似物、次生代谢物等类型，通过增强植物的生理功能，增加植物对致病因子的抵抗力，进而提高植物的诱导抗性。

植物免疫激活蛋白作为一种新型生物农药，在植物抗病、增产、提高品质等方面效果显著。目前，有关该技术已成功用于生产的实例有美国Eden公司研发的‘Messenger-HarpinEa’，还有以色列Galilee-Green实验室研发的‘HarpinEcc’。2013年，四川海博氏生物科技有限公司引进了Galilee-Green实验室的科研成果并命名为信号施康乐。中国农科院植物保护所从极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)中分离出植物免疫激活蛋白PeaT1和Hrip1(Stable isotope labeled mass spectrometry for quantification ofthe relative abundances for expressed proteins induced by PeaT1.Science ChinaLife Sciences,2010,53(12):1410-1417；Purification and characterization of aglycoprotein elicitor from Alternaria tenuissima.World Journal ofMicrobiologyand Biotechnology,2009,25(11):2035-2042)，以此开发出全球第一个能够抗植物病毒病蛋白生物农药‘阿泰灵’并于2014年登记上市。目前，该产品在我国已成功推广使用并受到广大农户好评。因此，鉴定和应用微生物分泌的植物免疫激活蛋白已成为国内外学者研究的热点，可为创制新型生物农药提供丰富的蛋白资源。

发明内容

本发明的目的是提供一种葡萄霜霉菌分泌的植物免疫激活蛋白及引物和应用，该植物免疫激活蛋白的突变体PvAvh77-M2能够诱导葡萄抗病相关基因的表达及防卫物质的积累，抑制葡萄霜霉菌的侵染，减轻霜霉菌对葡萄造成的危害，能够作为预防葡萄霜霉病的生物农药。

为了达到上述目的，本发明提供了一种葡萄霜霉菌分泌的植物免疫激活蛋白，该植物免疫激活蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明的另一目的是提供所述的植物免疫激活蛋白的编码基因，该编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。