[发明专利]一种活性焦固定化碳酸酐酶及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种活性焦固定化碳酸酐酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，将半焦颗粒与纳米二氧化硅按照质量比(5～10):1混合，依次经过捏合造粒、碳化和活化，得到富含纳米二氧化硅活性焦颗粒；

步骤2，将富含纳米二氧化硅活性焦颗粒浸泡在质量浓度30％浓硝酸或者20％双氧水溶液中，加热后搅拌，得到浸泡后的富含纳米二氧化硅活性焦颗粒，将浸泡后的富含纳米二氧化硅活性焦颗粒清洗至清洗后的液体pH值为中性，然后将清洗后的富含纳米二氧化硅活性焦颗粒烘干，得到表面预处理后的富含纳米二氧化硅活性焦颗粒；

步骤3，将表面预处理后的富含纳米二氧化硅活性焦颗粒加入到Tris-HCl缓冲液中，然后加入戊二醛和碳酸酐酶冻干粉，所述碳酸酐酶冻干粉与富含纳米二氧化硅活性焦颗粒的质量比为1：50，搅拌并超声处理后，得到附着有碳酸酐酶的二氧化硅活性焦颗粒，通过Tris-HCl缓冲液洗涤附着有固化碳酸酐酶的活性焦颗粒，得到活性焦固定碳酸酐酶。

2.根据权利要求1所述的一种活性焦固定化碳酸酐酶的制备方法，其特征在于，步骤1中，所述碳化过程为在600℃下，惰性气氛中进行加热；所述活化过程为在850℃的水蒸气下活化。

3.根据权利要求1所述的一种活性焦固定化碳酸酐酶的制备方法，其特征在于，所述纳米二氧化硅为亲水性纳米二氧化硅，所述纳米二氧化硅中硅烷醇基团的密度为2SiOH/nm²。

4.根据权利要求1所述的一种活性焦固定化碳酸酐酶的制备方法，其特征在于，所述纳米二氧化硅比表面积为130m²/g～440m²/g。

5.根据权利要求1所述的一种活性焦固定化碳酸酐酶的制备方法，其特征在于，步骤2中，加热至50℃搅拌，搅拌后浸泡2h。

6.根据权利要求1所述的一种活性焦固定化碳酸酐酶的制备方法，其特征在于，步骤3中，富含纳米二氧化硅活性焦颗粒和Tris-HCl缓冲液的比例为50g：200mL，富含纳米二氧化硅活性焦颗粒和戊二醛的比例为50g：20mL。

7.根据权利要求1所述的一种活性焦固定化碳酸酐酶的制备方法，其特征在于，步骤3中，所述Tris-HCl缓冲液的浓度为50mmol/L，pH为8。

8.根据权利要求1所述的一种活性焦固定化碳酸酐酶的制备方法，其特征在于，步骤3中，搅拌温度为20～35℃，超声处理时间为4h。

9.一种通过权利要求1-8任意一项所述的制备方法制得的活性焦固定化碳酸酐酶。

10.一种权利要求9所述的制备方法制得的活性焦固定化碳酸酐酶的应用，其特征在于，所述碳酸酐酶用于吸附二氧化碳。