[发明专利]GRP78调控抗乙型肝炎病毒颗粒分泌的抑制剂

说明书

本发明提供一种基于GRP78的抗乙型肝炎病毒抑制剂。本发明以GRP78蛋白为靶点，通过抑制/阻断乙肝病毒颗粒分泌实现抗乙型肝炎病毒功能。本发明通过质谱鉴定发现GRP78可以与乙肝病毒包膜的preS1相互作用，并证实GRP78与HBV Dane颗粒的分泌有关，是基于乙肝病毒颗粒分泌的靶点；preS1的小肽可以抑制乙肝病毒颗粒的分泌；借助噬菌体展示技术筛选出GRP78结合的小肽，通过抑制HBV病毒颗粒的包膜化过程实现抗乙型肝炎病毒功能。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及乙型肝炎病毒，具体涉及基于GRP78的抗乙型肝炎病毒抑制剂。

背景技术

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)是引起乙型肝炎的病原体，属嗜肝DNA病毒科。HBV感染是全球性的公共卫生问题。虽然疫苗的大规模临床使用已达30多年，但HBV感染病例的数量仍然很高。据报道，全世界约2.57亿人感染HBV，每年因CHB 所致的肝硬化或肝癌而死亡的有88.7万人。HBV的清除是艰难而迫切的。

HBV的生命周期大致可分为以下几个步骤：(1)HBV Dane颗粒通过其表面HBsAg 与肝细胞膜上的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)受体结合进入肝细胞；(2)核衣壳解聚，其内的rcDNA释放进入细胞核中；(3)rcDNA 修复转化成cccDNA，后者作为病毒模板开始转录合成病毒所需的成分；(4)cccDNA 的转录产物之一前基因组RNA(pgRNA)与P蛋白结合开始募集HBV核心蛋白(HBcAg)，组装形成核衣壳，同时以pgRNA为模板逆转录合成rcDNA；(5)成熟的核衣壳开始新一轮的感染，少部分脱衣壳rcDNA再次进入细胞核补充cccDNA储蓄池，其余大部分经由多囊泡小体(MVB)转运途径分泌出肝细胞外。

目前，临床效果较好的抗HBV药物有核苷酸类似物(nucleoside analog，NAs)和干扰素(interferon-a，IFN-a)。虽然IFN-a能有效抑制HBV复制，但是其不良反应多、应答率仅为20-30％，临床应用受限；而NAs的长期使用会导致耐药性以及停药后复发等问题。重要的是，两者均不能彻底消除cccDNA，故难以实现HBV的完全治愈。因此，开发新的抗HBV药物是亟需的。目前在临床开发的抗HBV药物有HBV进入抑制剂Myrcludex B、衣壳组装变构剂HAP_R01、HBsAg释放抑制剂REP 2139等，唯独尚未有HBV分泌相关抑制剂的报道。

发明内容

为了解决现有技术中的问题，本发明提供一种基于GRP78的抗乙型肝炎病毒抑制剂。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

基于GRP78的抗乙型肝炎病毒抑制剂，其特征在于：以GRP78蛋白为靶点，通过抑制/阻断乙肝病毒颗粒分泌实现抗乙型肝炎病毒功能。

上述基于GRP78的抗乙型肝炎病毒抑制剂，其特征在于：通过preS1同源性疏水小肽与GRP78的结合以抑制/阻断乙肝病毒颗粒分泌实现抗乙型肝炎病毒功能。所述 preS1同源性疏水小肽选自小肽pep56、pep59或/和pep415中的一种或几种。

本发明提供GRP78蛋白抑制剂在制备预防或治疗乙型肝炎病毒药物中的应用。

本发明提供GRP78蛋白抑制剂在诊断乙型肝炎病毒感染中的应用。

所述抑制剂选自GBP-63、GBP-64、GBP-65、GBP-66、GBP-67、GBP-68中的一种或几种组合。所述GBP-63的小肽序列为FHSHHNRPMKSP；所述GBP-64的小肽序列为GSWNTFRAQPTI；所述GBP-65的小肽序列为LTPHKHHKHLHA；所述GBP-66 的小肽序列为MKAHHSQLYPRH；所述GBP-67的小肽序列为SNIGALQFLPPP；所述 GBP-68的小肽序列为VTTVGMPNKSFF。

进一步，所述抑制剂由噬菌体展示技术获得。