[发明专利]一种基于荧光定量PCR技术的检测宫颈细胞基因甲基化的试剂盒与应用

权利要求书

1.一种用于检测宫颈细胞基因甲基化的组合物，其特征在于，所述组合物包括：

a.用于检测SOX1基因启动子区域中至少一个靶区域内的甲基化程度的制剂a；

b.用于检测PAX1基因启动子区域中至少一个靶区域内的甲基化程度的制剂b；

c.用于检测MSC基因启动子区域中至少一个靶区域内的甲基化程度的制剂c；

所述制剂a包括引物对a和探针a，所述引物对a包括碱基序列分别如SEQ ID No.1 和SEQ ID No.2 所示的正向引物和反向引物；所述探针a碱基序列如SEQ ID No. 3所示, 所述探针的两端分别标记有荧光报告基团、荧光淬灭基团；

所述制剂b包括引物对b和探针b，所述引物对b包括碱基序列分别如SEQ ID No.4 和SEQ ID No.5 所示的正向引物和反向引物；所述探针b的碱基序列为SEQ ID No.6所示，所述探针b的两端分别标记有荧光报告基团、荧光淬灭基团；所述制剂c包括引物对c和探针c，所述引物对c包括碱基序列分别如SEQ ID No.10和SEQ ID No.11 所示的正向引物和反向引物；所述探针c的碱基序列为SEQ ID No.12所示，所述探针c的两端分别标记有荧光报告基团、荧光淬灭基团；

每个所述探针上荧光报告基团互不相同。

2.根据权利要求1所述的用于检测宫颈细胞基因甲基化的组合物，其特征在于，所述组合物中还包含用于检测内参基因的引物和探针。

3.根据权利要求2所述的用于检测宫颈细胞基因甲基化的组合物，其特征在于，所述用于检测内参基因的引物包括碱基序列分别如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8 所示的正向引物和反向引物；所述用于检测内参基因的探针的碱基序列为SEQID No.9 所示，所述探针的两端分别标记有荧光报告基团、荧光淬灭基团。

4.根据权利要求1所述的用于检测宫颈细胞基因甲基化的组合物，其特征在于，所述荧光报告基团选自FAM、VIC或HEX、ROX、NED、CY3 或CY5，所述荧光淬灭基团选自BHQ1、BHQ2、BHQ3、Dabcy1 或Tamra。

5.根据权利要求1所述的用于检测宫颈细胞基因甲基化的组合物，其特征在于，所述组合物还包括以下组分中的任一种或几种：PCR 反应液、阳性对照、阴性对照。

6.如权利要求1-5任一项所述的组合物在制备宫颈癌诊断产品中的用途；所述宫颈癌为宫颈浸润癌、宫颈原位癌CIS和宫颈癌前病变CIN3期。