[发明专利]一种适用于厌氧细菌的胞外聚合物提取方法

权利要求书

1.一种适用于厌氧细菌的胞外聚合物提取方法，其特征在于，包括在厌氧环境下进行如下步骤：

获取厌氧细菌的生长培养液，将生长培养液进行离心弃上清液、清洗后重悬获得重悬液；

在冰水浴中对重悬液进行超声处理，离心去掉厌氧细菌，获取上清液；

将上清液过滤去除掉残留的细菌细胞获得滤液，该滤液即为厌氧细菌的胞外聚合物；

所述超声处理的处理条件为60W、40kHz，超声处理时间5～8min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生长培养液的离心条件为4000rpm、5～8min、4℃；

所述重悬液的离心条件为8000rpm、20min、4℃。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述清洗和重悬时所采用的溶液为磷酸盐缓冲溶液或氯化钠溶液。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲溶液为浓度为10mM的Na₂HPO₄和浓度为2mM的KH₂PO₄混合溶液；

所述氯化钠溶液的浓度为0.1wt％。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述上清液过滤时采用的滤膜的孔径为0.22μm，材质为聚醚砜或聚四氟乙烯。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述厌氧环境为手套箱内含95％氮气和5％氢气的环境。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述生长培养液的获取过程为：

将培养液进行脱氧处理，然后再分装到厌氧瓶中进行灭菌；

将厌氧细菌接种到厌氧瓶中进行培养后即可获得生长培养液。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述生长培养液为厌氧细菌培养至对数期、稳定期或衰退期后得到的培养液。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述脱氧处理的过程为：将培养液煮沸，然后趁热转移到厌氧手套箱中，利用真空泵抽取空气，待溶液不再沸腾后，通入纯度为99.99％以上的氮气，重复抽气至少三次。