[发明专利]一种感染性肛瘘动物模型的构建方法

说明书

本发明涉及一种感染性肛瘘动物模型的构建方法，并利用该动物模型筛选肛瘘损伤治疗药物或模拟临床给药的方法与疗效评价，制备方法包括：PVC包裹铝丝自肛门左或右侧约1 cm处穿过肛门括约肌，使之围绕肛门括约肌呈虚挂状态，同时，给予待造模动物更换新鲜2~5%葡聚糖硫酸钠盐饮用水，约至1周后，见伤口有脓性分泌物且轻度压迫瘘管外周时有大量粪性分泌物溢出，同时结合磁共振成像（MRI）检查和病理学分析结果显示高信号影的线条状瘘管形成与病理学检查符合肛瘘的病理变化，本发明造模成功率高、稳定性好、操作简单、经济适用，重要是能有效模拟临床肛瘘的发病经过，非常适合于临床对肛瘘病症的研究，解决了当前“无合理性”的肛瘘动物模型问题。

技术领域

本发明涉及医学动物模型研究领域，具体涉及一种感染性肛瘘动物模型的构建方法。

背景技术

肛瘘是一种反复发作的肛肠疾病且属于一种慢性感染性管道，临床表现为反复发作的肛周感染，破溃流脓，疼痛、瘙痒等局部症状；在临床上肛瘘主要分为单瘘和多瘘，即：数外口或数瘘管，如果只有一个，则称为单纯性肛瘘，如果是多个，则称为复杂性肛瘘。目前，国内外治疗肛瘘的手术方法很多，例如：切开引流、肛瘘切开术、瘘管剔除术、挂线术、瘘管填塞术等，该些方法都存在一定的复发率、二次感染和肛门失禁等一系列问题。到目前为止，全球范围内还缺乏肛瘘的“标准术式”及客观的手术前后疗效评价体系，美国结直肠外科肛瘘诊疗指南中提出可以“带瘘生存”。 故拟通过动物模型的构建来进一步研究不同手术方式以及手术后肛门功能的比较，为后续有效控制且治愈该疾病发挥重要的参考作用。

肛瘘动物模型是研究肛瘘发病及治疗的一种重要手段。当前，没有一个合理的、成熟的肛瘘实验模型可用。此前有研究者报道了几种造模方式：① 动物体表造瘘模型，该模型严格意义上不属于肛瘘动物模型，因为瘘管与肛门无相关性；② 动物肛管引流线造瘘模型，该模型的瘘管上皮化程度一致性很难统一，其与引流时间、引流线的材质等有关，如延长实验时间，瘘管上皮化是否均出现还有待研究；③ 大鼠背部瘘管模型，该模型采用背部创面涂以标准的金黄色葡萄球菌或加盖人新鲜粪便混悬液，其可用于研究创面感染与修复，而与肛门瘘管形成无相关性；④ 动物肛门螺纹钢丝造瘘模型，该方法采用螺纹钢丝（钢针）穿过肛门括约肌形成虚挂引流，有研究显示造模30天后（成模周期较长），肛周大体观察均未表现出感染腐蚀痕迹，且螺纹钢丝（钢针）易于被肛周组织包围形成闭合状态，无法摘除螺纹钢丝进行后续评价和治疗。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种感染性肛瘘动物模型的构建方法，造模成功率高、稳定性好、操作简单、经济适用，重要是能有效模拟临床肛瘘的发病经过，非常适合于临床对肛瘘病症的研究，解决了当前“无合理性”的肛瘘动物模型问题。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

该动物模型构建方法包括以下步骤：动物进入麻醉状态后，用电动剃须刀将动物手术区的毛发剃去，并用脱毛膏将手术区的毛发脱干净。待动物进入深度麻醉状态后，使其仰卧于手术台加热垫上，胶带固定四肢。利用PVC包裹2.5 mm²铝丝自肛门左侧约1 cm处穿过肛门括约肌，在穿透皮肤后，取合适的长度，旋转固定，使之围绕肛门括约肌呈虚挂状态；同时，给予待造模动物更换新鲜葡聚糖硫酸钠盐饮用水约至1周。从上述实验动物中挑选出线条状瘘管的个体作为肛瘘动物模型。

所述铝丝为BLV单芯电解铝。

所述实验动物选自SPF级大鼠。

所述葡聚糖硫酸钠盐饮用水拟采用自由饮水或灌胃方式。

所述葡聚糖硫酸钠盐饮用水浓度为2~5%。

所述括约肌呈虚挂状态期间，实验动物按需自由饮食。

所述肛瘘动物模型包含简单性肛瘘动物模型和复杂性肛瘘动物模型。