[发明专利]褐藻胶裂解酶及其应用

说明书

本发明公开了一种褐藻胶裂解酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。编码该褐藻胶裂解酶的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述褐藻胶裂解酶在降解褐藻胶或海藻酸钠中的应用，在制备褐藻寡糖中的应用。本法发明还公开了一种制备褐藻寡糖的方法：采用褐藻胶裂解酶降解褐藻胶制备褐藻寡糖，最适反应pH为9.0，最适反应温度为60℃，反应时间2 h，所得褐藻寡糖的聚合度为2～4。本发明的褐藻胶裂解酶，可以在温和的条件下裂解褐藻胶或海藻酸钠，酶活性高，且具有较好的温度稳定性，相较于已报道的褐藻胶裂解酶，可在底物溶解性较好的高温下进行反应，可高效降解褐藻胶制备褐藻寡糖。

技术领域

本发明涉及褐藻胶裂解酶及其应用，属于功能裂解酶发掘技术领域。

背景技术

我国褐藻资源丰富，具有很高的开发应用价值。以褐藻为原料可以提取大量的褐藻胶，褐藻胶具有较强的水合性、粘结性，在食品、医药、化工行业具有广泛应用。但由于褐藻胶为长链生物多糖，直接食用难以被动植物吸收利用，限制了其在功能性产品领域的应用。将褐藻胶水解为褐藻寡糖，可大大增加其水溶性和吸收利用性，且褐藻寡糖还具有降血糖、抗炎症、调节免疫力、促进动植物生长等功能，将褐藻胶水解为褐藻寡糖可进一步提升褐藻的应用价值和经济价值，大大拓宽海藻资源的应用范围。

将褐藻胶水解为褐藻寡糖主要有酸水解法、酶水解法和氧化降解法三种方法，其中酸水解法需使用大量强酸试剂，氧化降解法需要使用过氧化氢等强氧化试剂，这两种方法都存在着反应过程剧烈、产物易受损失、环境污染隐患等问题。酶水解法主要使用褐藻胶水解酶，利用褐藻胶水解酶的高效水解作用进行褐藻胶的生物水解，水解过程条件温和、产物生物安全性高，且水解产物具有一定的聚合度范围，是使用褐藻胶生产褐藻寡糖最具开发潜力的一种方法。

发明内容

针对上述现有技术，本发明提供了一种褐藻胶裂解酶，及其在褐藻寡糖制备中的应用，使用该褐藻胶裂解酶降解大分子量褐藻胶可制备聚合度较为单一的褐藻寡糖。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种褐藻胶裂解酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，其来源于噬琼脂链卵菌（Catenovulum agarivorans）。

褐藻胶裂解酶的氨基酸序列（如SEQ ID NO:1所示）：

MYKSVLIGVS LAITSLTAAA GQQVGATLNH KQSLALADIP AGVIKQIAAV RPKFVAKEAEKEFKHGKVYI DVEGLDQYGN EIEFDMLQQD GTWKIVEIQR DLEMSQCPDS VVIALTKAHP DIQPKRIIESEQATGEIIYE FYTVDSAGQE AKYEVKLANG TAELLNQEWQ H。

编码上述褐藻胶裂解酶的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

编码褐藻胶裂解酶的基因的核苷酸序列（如SEQ ID NO:2所示）：