[发明专利]一种靶向抑制circ LATS2基因表达的siRNA及其应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种靶向抑制circLATS2基因表达的siRNA及其应用。本发明提供环状RNA circ0007590抑制剂在制备治疗胰腺癌的药物中的应用，环状RNA circ0007590抑制剂包括抑制circ LATS2基因表达的si‑circLATS2‑1、si‑circLATS2‑2和si‑circLATS2‑3中的至少一种，三条siRNA有着较高的干扰效率(70％)；在HPAF‑II细胞系中，敲低环状RNA circ0007590的表达水平显著抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭水平，即下调表达环状RNA circ0007590可以抑制胰腺癌细胞株的生长。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种靶向抑制circLATS2基因表达的siRNA及其应用。

背景技术

小RNA干扰(small interference RNA，RNAi)技术是近几年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法，其是由与靶基因序列同源的双链RNA(dsRNA)引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。RNAi作用的高度特异性，有可能特异地抑制致病的突变等位基因，但又不影响正常等位基因功能，所以RNAi在基因治疗上有广阔的应用前景。

RNAi作用机制是双链RNA(dsRNA)导入细胞后，在Dicer酶的作用下，裂解为21-25个核苷酸组成的小干扰RNA(siRNA)，并与细胞内核酸内外切酶、解链酶、Argonaute蛋白等结合，形成具有多个亚单元的核糖核苷酸蛋白复合物-RISC(RNA-inducing silencingcomplex)，高效递进式介导细胞内源性的同源mRNA的降解。哺乳动物细胞内，导入长双链RNA可导致基因表达广泛抑制，直接应用短双链的siRNA同样高效介导RNAi，并避免非特异性基因抑制效应。且短双链siRNA通过化学方法易合成，操作简便、转染效率高，对细胞的或者组织的毒副作用小，可大规模制备，临床应用方便，在药物开发方面具有不可替代的优势。

但是，由于siRNA的碱基分布，两端自由能大小及靶mRNA的二级结构等因素的影响，靶向同一基因mRNA不同靶点的siRNA，封闭基因表达的效果明显不同。在siRNA沉默特定基因的实验中，为保证siRNA能高效降解靶mRNA，一般需要针对靶基因设计合成多条不同序列的siRNA，从中筛选出有效序列。有效siRNA序列的设计筛选是siRNA介导RNAi实验的关键点之一。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种靶向抑制circLATS2基因表达的siRNA及其应用。本发明设计的siRNA序列具有较高的干扰效率(70％)，降低环状RNA circ0007590的表达水平，进而使得抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭水平。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

第一目的，本发明提供了一种环状RNA circ0007590抑制剂在制备治疗胰腺癌的药物中的应用，环状RNA circ0007590对应的亲本基因为LATS2基因，所述环状RNAcirc0007590抑制剂包括抑制circLATS2基因表达的siRNA。

作为本发明所述应用的优选实施方式，所述siRNA包括si-circLATS2-1、si-circLATS2-2和si-circLATS2-3中的至少一种，所述si-circLATS2-1的序列如SEQ ID NO.1所示，所述si-circLATS2-2的序列如SEQ ID NO.2所示，所述si-circLATS2-3的序列如SEQID NO.3所示。

本发明基于环状RNA circ0007590设计出特异siRNA，实验发现，在HPAF-II细胞系中，敲低环状RNAcirc0007590的表达水平显著抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭水平，即下调表达环状RNA circ0007590可以抑制胰腺癌细胞株的生长。

第二目的，本发明提供了一种胰腺癌的治疗药物，所述治疗药物包括环状RNAcirc0007590抑制剂。