[发明专利]一种快速鉴定岱衢族大黄鱼性别的分子标记及应用

说明书

本发明一种快速鉴定岱衢族大黄鱼性别的分子标记及应用，属于分子鉴定技术领域。本发明一方面提供了一种快速鉴定岱衢族大黄鱼性别的分子标记，另一方面提供了该分子标记的应用及应用方法。本发明通过提取待检测岱衢族大黄鱼样本的DNA，配合性别特异分子标记的引物进行PCR扩增，而后进行琼脂糖凝胶电泳检测，可以准确判断岱衢族大黄鱼的性别，与原有技术相比，岱衢族大黄鱼性别检测准确率为100%，且可在当天出结果，可重复性高。通过此方法，为岱衢族大黄鱼性别控制育种与单性化养殖奠定了技术基础。

技术领域

本发明属于分子鉴定技术领域，具体涉及一种快速鉴定岱衢族大黄鱼性别的分子标记及应用。

背景技术

大黄鱼是我国重要的经济鱼类，也是我国四大海产之一，分布于西北太平洋区，包括中国、日本、韩国、越南沿海，在中国主要分布于黄海南部、东海。近年来，经过长期的人工繁育和人工养殖，大黄鱼产业发展迅速。依据分节特征和体型量度特征，已有研究将大黄鱼地理种群划分为岱衢族、闽粤东族和硇州族三个群体。吕泗洋、岱衢洋和猫头洋等产卵群体属于岱衢族；闽粤东族包括官井洋、南澳和汕尾等产卵群体；硇州族则仅有硇州产卵群体。目前有关大黄鱼遗传背景的研究已经逐渐丰富，相关的研究包括国内外学者对养殖、野生大黄鱼的染色体核型、同工酶酶谱、不同群体遗传多样性水平等的研究，但是这些研究多是针对我国沿海3个大黄鱼地理种群之一的闽粤东族进行的。且研究结果也表明闽粤东族大黄鱼与岱衢族大黄鱼染色体核型存在差异。

已有研究表明，大黄鱼是一个XX/XY性别决定系统的鱼类，由于大黄鱼在性成熟时，雌雄个体在生长方面具有明显的性别二态性，雌性腹部隆起，体态臃肿，雄性则体态较为苗条，雌性重量显著高于雄性。因此，开展大黄鱼性别控制育种及单性化养殖，具有较高的市场潜力。而遗传性别分子标记的开发与应用，是性别控制育种的基础，在遗传性别分子标记的基础上，配合雌核发育，外源雄激素的诱导等方法，可以实现XX伪雄鱼亲鱼的制备，从而进一步获得XX全雌鱼。另一方面，通过遗传性别分子标记，配合外源雌激素的诱导，可以筛选出XY伪雌鱼，将XY伪雌鱼与XY雄鱼进行交配，可以筛选出YY超雄鱼亲鱼，进一步获得XY型的全雄鱼。可见，遗传性别分子标记在性别控制育种中是非常重要的技术手段。

目前，对大黄鱼遗传性别分子标记的研究成果，主要集中在闽粤东族群体中，且已有应用。然而，该分子标记在岱衢族大黄鱼中的应用效果并不能达到100%的鉴别率，原因是不同的地理种群已经在外形及性别决定位点的选择上产生了分化。岱衢族大黄鱼近年来已有两个水产新品种“东海1号”和“甬岱1号”宣告问世，其对产业的助推作用明显，产量也在逐年增加，因此，开发一种岱衢族大黄鱼的遗传性别分子标记，是亟待解决的技术难题。

中国专利公布号CN107236814A和CN108424958B公开了一种鉴别大黄鱼遗传性别的分子标记及其应用以及一种大黄鱼遗传性别相关的SNP标记及其引物和应用，上述二者通过遗传分子标记表现核苷酸序列的插入/缺失长度多态性和为性别相关的SNP标记与大黄鱼的性别紧密相关，能够用于大黄鱼雌雄性别的鉴别。但是由于上述性别分子标记主要应用于闽粤东族大黄鱼，因此此方法具有明显的种群特异性，并不适用于岱衢族大黄鱼，尤其是大黄鱼新品种“甬岱1号”的性别鉴定。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种快速鉴定岱衢族大黄鱼性别的分子标记及应用的技术方案。该技术方案通过提取待检测岱衢族大黄鱼样本的DNA，配合性别特异分子标记的引物进行PCR扩增，而后进行琼脂糖凝胶电泳检测，可以准确判断岱衢族大黄鱼的性别，目前检测准确率为100%，且可在当天出结果。为岱衢族大黄鱼性别控制育种与单性化养殖奠定了技术基础。

本发明通过以下技术方案加以实现：

本发明一方面提供了一种快速鉴定岱衢族大黄鱼性别的分子标记，该分子标记的正向引物F的序列如SEQ ID No.1所示，反向引物R序列如SEQ ID No.2所示。

本发明另一方面提供了利用分子标记在快速鉴定岱衢族大黄鱼性别中的应用。