[发明专利]一种免疫测定方法及其应用

权利要求书

1.一种免疫测定方法，其包括如下步骤：

S1：对含待测靶分子的待测样本进行两个平行的免疫反应检测，记录两个平行的免疫反应的检测结果，分别计为第一测值和第二测值；

S2：计算第一测值/第二测值的比值；

S3：确定待测样本中待测靶分子的浓度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述两个平行的免疫反应检测中，待测靶分子的含量/特异性捕获分子的含量的比值不同；其中所述特异性捕获分子能够与待测靶分子特异性结合。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述两个平行的免疫反应检测中，特异性捕获分子的含量/待测靶分子的含量的比值更大的免疫反应的检测结果计为第一测值，另一个为第二测值。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述待测靶分子选自抗原或抗体；和/或

所述特异性捕获分子包括与固相物质结合的第一捕获分子和标记物标记的第二捕获分子。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述特异性捕获分子的含量为第一捕获分子的含量、第二捕获分子的含量或者第一捕获分子与第二捕获分子的含量之和；优选为第一捕获分子的含量。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述确定待测样本中待测靶分子的浓度的方式为将所述待测样本的第一测值/第二测值的比值代入相关性标准曲线进行计算。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，获得所述相关性标准曲线的方法包括如下步骤：

A1：对待测靶分子含量已知的一系列不同浓度标准物质进行检测，其中对每个标准物质均进行两个平行的免疫反应检测，记录两个平行的免疫反应的检测结果，分别计为测值a和测值a’；优选地，所述两个平行的免疫反应检测中，特异性捕获分子的含量/待测靶分子的含量的比值更大的免疫反应的检测结果计为测值a；

A2：计算测值a/测值a’的比值；

A3：做测值a/测值a’的比值与标准物质浓度的相关性标准曲线。

8.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述确定待测样本中待测靶分子的浓度的方式为：

当待测样本的第一测值/第二测值的比值≤临界点c时，使用反应曲线A的前带区域计算待测样本中待测靶分子的浓度；当待测样本的第一测值/第二测值的比值＞临界点c时，使用反应曲线B的后带区域计算待测样本中待测靶分子的浓度。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：

B1：对待测靶分子含量已知的一系列不同浓度标准物质进行检测，其中对每个标准物质均进行两个平行的免疫反应检测，记录两个平行的免疫反应的检测结果，分别计为测值b和测值b’；优选地，所述两个平行的免疫反应检测中，特异性捕获分子的含量/待测靶分子的含量的比值更大的免疫反应的检测结果计为测值b；

B2：做测值b与标准物质浓度的反应曲线A；

B3：做测值b’与标准物质浓度的反应曲线B；

B4：在反应曲线A的前带区域与反应曲线B的后带区域所对应的标准物质浓度重叠的部分中取一点，将该点对应的测值b/测值b’的比值记为临界点c。

10.一种如权利要求1-9中任一项所述的方法在化学发光免疫检测、酶联免疫检测和免疫比浊免疫检测中的应用；优选在化学发光免疫检测中的应用；进一步优选在光激化学发光免疫检测中的应用。