[发明专利]一种过氧化氢酶制备方法在审
申请号: | 202111285947.8 | 申请日: | 2021-11-02 |
公开(公告)号: | CN114032221A | 公开(公告)日: | 2022-02-11 |
发明(设计)人: | 陈武根;陈耿鸿;袁群;黄石桥;李书文;石团结;游启进;何满春;雷敏;严钦菊 | 申请(专利权)人: | 湖南康捷生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/08 | 分类号: | C12N9/08 |
代理公司: | 北京广技专利代理事务所(特殊普通合伙) 11842 | 代理人: | 安琪 |
地址: | 415000 湖南省常*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 过氧化氢酶 制备 方法 | ||
1.一种过氧化氢酶制备方法,其特征在于,包括:
将原始菌种在培养基上进行培养,获得含有过氧化氢酶的菌种;
对所述菌种进行粗酶液制备后,对所述粗酶液进行乙醇沉淀,
将沉淀后的粗酶液进行层析和超滤,获得过氧化氢酶制品。
2.如权利要求1所述的一种过氧化氢酶制备方法,其特征在于,
将原始菌种在培养基上进行培养获得培养种子,根据培养种子进行接种并发酵,获得含有过氧化氢酶的菌种还包括:
所述培养种子通过种子培养基进行培养获得,所述种子培养基为ph7.5的麦芽汁;所述麦芽汁的糖度为6°~8°;
在培养基上培养25~35小时候获得培养种子,进一步对培养种子置入发酵培养基进行发酵,获得含有过氧化氢酶的菌种。
3.如权利要求2所述的一种过氧化氢酶制备方法,其特征在于,
所述发酵培养基包括:葡萄糖、NaNO3、MgSO4〃7H2O、Na2HPO4、KH2PO4、FeSO4〃7H2O;
将所述葡萄糖、NaNO3、MgSO4〃7H2O、Na2HPO4、KH2PO4、FeSO4〃7H2O混合并定容至lL。
4.如权利要求3所述的一种过氧化氢酶制备方法,其特征在于,
所述发酵培养基为pH 7.5;
葡萄糖为8-12g、NaNO3为8~12g、MgSO4〃7H2O为3~7g、Na2HPO4为8-12g、KH2PO4为0.8-1.2g、FeSO4〃7H2O为0.015~0.035g。
5.如权利要求4所述的一种过氧化氢酶制备方法,其特征在于,
葡萄糖为8g、NaNO3为8g、MgSO4〃7H2O为6g、Na2HPO4为10g、KH2PO4为0.86g、FeSO4〃7H2O为0.018g。
6.如权利要求4所述的一种过氧化氢酶制备方法,其特征在于,
葡萄糖为10g、NaNO3为12g、MgSO4〃7H2O为5g、Na2HPO4为9g、KH2PO4为0.98g、FeSO4〃7H2O为0.026g。
7.如权利要求2所述的一种过氧化氢酶制备方法,其特征在于,
培养种子的培养包括:种子培养基置于培养瓶中,接种到培养瓶进行混匀获得悬液;
其中,在旋转装置上以转速300转/分钟进行混匀,发酵培养时间为10~15小时。
8.如权利要求7所述的一种过氧化氢酶制备方法,其特征在于,
所述发酵培养还包括:将混匀后的悬液置于发酵罐中,以4%~8%的接种量进行接种培养种子,并在接种成功后对其进行混匀并发酵,
所述发酵时间为25~35小时。
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