[发明专利]一种用于同时检测多种致猪死亡的病原微生物的引物探针组、试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及诊断试剂盒，特别是涉及一种用于同时检测多种致猪死亡的病原微生物的引物探针组、试剂盒及其应用。本发明提供了一种同时检测多种致猪死亡的病原微生物的引物探针组，所述引物探针组的核苷酸序列如SEQ IDNO.1～SEQ ID NO.90所示。采用本发明所述引物探针组能够快速、准确、高通量检测猪发病或致死病原。而且在猪发病或死亡病因未知时，或者只知晓大体临床性状如消化系统疾病但不清楚病原时，采用本发明所述引物探针组可以快速锁定是否感染可致猪死亡的病原，有利于及时准确的临床用药，避免更多的猪感染或死亡。

技术领域

本发明涉及诊断试剂盒，特别是涉及一种用于同时检测多种致猪死亡的病原微生物的引物探针组、试剂盒及其应用。

背景技术

生猪养殖业是国内畜牧业的重要组成部分，中国不仅是生猪养殖大国，也是猪肉消费大国。因此，生猪的健康高效养殖在生猪保供和猪肉安全中发挥重要作用。国内当下的生猪养殖业，猪病的形势越发复杂，混合感染的现象也越来越多,猪群疫病的防控越发棘手，每年给生猪养殖业造成的经济损失不可估量。对发病猪只快速明确病因锁定病原，有利于及时采取精准的防治干预措施，有效控制疫病在猪群的蔓延，降低生猪的发病和死亡率，这将是保障生猪养殖业健康发展的必要手段。

但实际生产中，生猪发病初期，不同病原感染引发的临床症状往往很相似，如发热、食欲减退、精神不振等表现，即使都是表现呼吸道疾病症状，引发感染的病原也不能明确是细菌还是病毒，从而无法精准下药防治。因此，亟需开发一种可快速、准确、通量检测猪发病或致死病原的方法，以及时有效控制猪群疫病发展。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种用于同时检测多种致猪死亡的病原微生物的引物探针组、试剂盒及其应用。采用本发明所述引物探针组能够快速、准确、通量检测猪发病或致死病原。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供了一种同时检测多种致猪死亡的病原微生物的引物探针组，所述引物探针组的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.90所示。

优选的，所述病原微生物包括引发猪消化系统疾病的病原微生物、引发猪神经系统疾病的病原微生物、引发猪呼吸系统疾病的病原微生物优选和引发猪皮肤病的病原微生物。

优选的，所述引发猪消化系统疾病的病原微生物包括猪流行性腹泻病毒、猪传染性肠胃炎病毒、A型轮状病毒、猪瘟病毒、非洲猪瘟病毒、猪霍乱或副伤寒沙门氏菌、大肠杆菌中产志贺毒素大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌、产肠毒素性大肠杆菌、魏氏梭菌和弓形虫；所述引发猪神经系统疾病的病原微生物包括狂犬病毒、伪狂犬病毒、猪乙脑病毒和李斯特菌；所述引发猪呼吸系统疾病的病原微生物包括猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪流感病毒、猪炭疽杆菌、猪多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪链球菌2型、猪链球菌9型、肺炎支原体和棘球蚴；所述引发猪皮肤病的病原微生物优选包括口蹄疫病毒、猪丹毒杆菌和附红细胞体。

优选的，检测猪流行性腹泻病毒的引物探针组包括核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的PEDV-NF、核苷酸如SEQ ID No.2所示的PEDV-NR和核苷酸如SEQ ID No.3所示PEDV-NP；

检测猪传染性肠胃炎病毒的引物探针组包括核苷酸序列如SEQ ID No.4所示的TGEV-NF、核苷酸序列如SEQ ID No.5所示的TGEV-NR和核苷酸序列如SEQ ID No.6所示的TGEV-NP；

检测A型轮状病毒的引物探针组包括核苷酸序列如SEQ ID No.7所示的PRAV-VP6F、核苷酸序列如SEQ ID No.8所示的PRAV-VP6R和核苷酸序列如SEQ ID No.9所示PRAV-VP6P；

检测猪瘟病毒的引物探针组包括核苷酸序列如SEQ ID No.10所示CSFV-5UTRF、核苷酸序列如SEQ ID No.11所示的CSFV-5UTRR和核苷酸序列如SEQ ID No.12所示的CSFV-5UTRP；