[发明专利]靶向CD276的嵌合抗原受体、嵌合抗原受体T细胞及制备方法和制药应用

说明书

本发明公开了一种靶向CD276的嵌合抗原受体、嵌合抗原受体T细胞及制备方法和制药应用，属于生物医药技术领域。本发明公开的靶向CD276的嵌合抗原受体T细胞可以靶向表达CD276的肿瘤细胞，激活T细胞发挥细胞免疫作用，高效且特异性地杀伤CD276阳性肿瘤细胞，更好地维持嵌合抗原受体T细胞的活力和杀伤力，是有潜力的根治肝细胞癌的免疫细胞疗法。本发明经过体外功能测试，靶向CD276的嵌合抗原受体T细胞对CD276阳性肝癌细胞系有杀伤活性。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种靶向CD276的嵌合抗原受体、嵌合抗原受体T细胞及制备方法和制药应用。

背景技术

肝细胞癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤，占所有原发性肝癌的90％，是全球第二大致死性癌症。目前针对肝细胞癌的治疗方法比如化疗、放疗、肝切除术、消融疗法、靶向疗法如索拉菲尼、抗体疗法如免疫检查点抑制剂、血管内皮生长因子受体抑制剂，然而这些疗法的疗效都是不够的(Lee,Y.H.,et al.,Combinational Immunotherapy forHepatocellular Carcinoma:Radiotherapy,Immune Checkpoint Blockade andBeyond.Frontiers in Immunology,2020.11.)，对病人和病人的家庭造成了难以挽回的伤害。因此迫切需要的新的治疗肝细胞癌的药物。

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法是新型的免疫细胞治疗方法，具有特异性且高效的杀伤表达相应抗原的肿瘤细胞的功能，它通过基因工程手段使嵌合抗原受体表达在T细胞表面，通过在体外制备和扩增嵌合抗原受体T细胞，然后回输至人体，激活自身免疫系统，发挥对肿瘤细胞的高效杀伤(1.Rafiq,S.,C.S.Hackett,and R.J.Brentjens,Engineeringstrategies to overcome the current roadblocks in CAR T cell therapy.NatureReviews Clinical Oncology,2020.17(3):p.147-167.；2.Benmebarek,M.R.,et al.,Killing Mechanisms of Chimeric Antigen Receptor(CAR)T Cells.InternationalJournal of Molecular Sciences,2019.20(6).)嵌合抗原受体T细胞技术被认为是最有可能攻克癌症的疗法，并且靶向CD19的CAR-T细胞在血液肿瘤中产生了良好的效果。目前全球已有6款CAR-T药物获批上市，展现了CAR-T细胞治疗在治疗癌症中的巨大应用前景。

CD276又称为B7-H3，是属于B7家族的一类跨膜蛋白。CD276在多种癌症中高表达，包括肺腺癌、脑胶质瘤、神经母细胞瘤、胰腺癌和卵巢癌等，在正常组织中几乎不表达。靶向CD276的单克隆抗体在多种肿瘤模型中介导肿瘤的有效清除。CD276在肝细胞癌高表达并且与肝癌的进展和肿瘤病人的不良预后相关。这提示，CD276可以作为一个治疗肝细胞癌的有潜力靶点。

目前，靶向CD276的CAR-T细胞对肝细胞癌和其它高表达CD276的恶性肿瘤的杀伤活性研究有限。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种靶向CD276的嵌合抗原受体、嵌合抗原受体T细胞及制备方法和制药应用。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明的内容之一在于，提供一种靶向CD276的嵌合抗原受体，所述靶向CD276的嵌合抗原受体包括如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。

优选地，所述靶向CD276的嵌合抗原受体的编码基因包括如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。

优选地，所述靶向CD276的嵌合抗原受体包括从氨基端到羧基端依次为靶向CD276的单链抗体、胞外铰链区、跨膜区和胞内结构区的氨基酸序列。