[发明专利]一种抗细胞内支原体感染的药物制剂及其用途

说明书

本发明公开了一种抗细胞内支原体感染的药物制剂及其用途，属于医药技术领域。该药物制剂为终浓度为10mg/ml的司帕沙星溶液剂，通过司帕沙星溶于0.1mol/l的NaOH溶液中并依次经0.45μm和0.22μm的过滤器过滤得到，用于细胞培养时预防细胞感染支原体和清除感染细胞的支原体，有效使用剂量为0.01–0.1mg司帕沙星/ml细胞培养基，每1‑2天/次，持续使用7天。本发明采用碱溶液溶解法将司帕沙星原药溶于NaOH溶液中制备溶液制剂，可替代青链霉素用于细胞培养时预防细胞感染支原体和清除感染细胞的支原体，抗菌效果好，毒性和耐药性低，有效杀伤支原体的同时对细胞损伤小，且可预防支原体再次污染细胞。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种抗细胞内支原体感染的药物制剂及其用途，用于细胞培养时预防细胞感染支原体和清除感染细胞的支原体。

背景技术

细胞培养中支原体是最常见的污染/感染细胞的微生物，研究表明全球实验室中可能有高达35％的细胞存在支原体污染，即使全球实验室最认可的美国模式培养物集存库(American type culture collection，ATCC)细胞中也存在部分细胞株有支原体污染的报道。支原体污染细胞的危害在于可导致细胞生理学、基因表达及对药物反应的改变，导致实验结果的不稳定性和不可重复性。同时，支原体感染细胞并不易被发现，其感染细胞时可能并未对细胞生长形态产生太大影响(但此时部分基因表达、药物反应性等已不同于正常细胞)，使研究者容易放松对支原体感染的警惕，不采取预防或干预措施，放任支原体污染细胞。此外，由于细胞间支原体主要来源于实验操作者，并且支原体可以通过气溶胶、接触等形式在细胞培养箱乃至整个细胞培养间内进行播散，导致细胞间大规模的支原体感染。因此，需要有专门用于杀灭支原体的制剂。

目前，研发的杀灭支原体制剂如清除细胞支原体污染的试剂有多种，根据其作用机制分为阻断支原体蛋白质合成和核酸合成两大类，市售制剂商品名有BM cyclin、Mycoplasma Removal Agent(MRA)、Ciprobay、Baytril、Zagam、Plasmocin、MycoplasmaTerminator等。上述药物尽管可以清除支原体，但其不足也较为明显：(1)对细胞毒性大，从而导致细胞损伤；(2)起效慢，处理时间达14天，部分细胞持续干预21天；(3)容易导致支原体产生耐药性。由于清除支原体时间较长，导致支原体获得耐药性，而且对再次发生支原体污染的细胞作用不佳。因此，亟待需要开发一种快速、低细胞毒性的抗支原体污染药物。

司帕沙星(Sparfloxacin，Spara)对支原体等病原菌有强大的杀伤作用，对肺炎支原体较环丙沙星、氧氟沙星和氟哌酸强8–62倍，可迅速有效地清除细胞中支原体，其作用机制主要通过靶向DNA促旋酶抑制DNA合成进而发挥杀菌作用，且不影响细胞内DNA、RNA的合成，对细胞功能影响小，可实现一方面迅速有效地清除细胞中支原体保护细胞生存和功能、另一方面防止支原体耐药的目的。但是，司帕沙星原药不溶于水，仅溶于二甲基亚砜，而二甲基亚砜对细胞有一定的损伤作用，特别是对感染支原体的细胞(此时细胞状态较差)有较强的诱导死亡作用，不能直接用于细胞培养场合。另外，对于公共细胞培养环境仅仅清除支原体还不够，细胞可能面临再次污染或者新细胞的支原体污染。因此，急需一种强有力的支原体杀伤制剂为细胞构筑一道防线，预防支原体污染细胞。

发明内容

为克服现有技术的上述不足，本发明的主要目的是提供司帕沙星在制备抗细胞内支原体感染的药物制剂中的用途。

本发明的另一目的是提供一种抗细胞内支原体感染的药物制剂。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供司帕沙星在制备抗细胞内支原体感染的药物制剂中的用途。

作为优选的技术方案，所述药物制剂为以司帕沙星为活性成分且终浓度为10mg/ml的溶液剂。

优选地，所述溶液剂通过司帕沙星溶于0.1mol/l的NaOH溶液中并依次经0.45μm和0.22μm的过滤器过滤得到。