[发明专利]一株枯草芽孢杆菌SD-KC-001及其应用

权利要求书

1.一株枯草芽孢杆菌Bacillus subtilisSD-KC-001，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌SD-KC-001保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCC No.23135。

2.如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌SD-KC-001的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤S1：种子制备；将菌种进行活化，做甘油管在超低温冰箱-80℃下保藏待用，发酵生产前，将菌种接种至对应的培养基中扩培，容器为茄子瓶或三角瓶，所述培养基按质量百分比，由如下组分组成：牛肉膏0.20～0.50％、氯化钠0.30～0.80％、蛋白胨0.80～1.20％、琼脂1.50～2.00％，余量为水，pH 7.0～7.5，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至2～8℃的冰箱中保藏作为一级菌种备用；

步骤S2：培养基称量配制；发酵生产时，严格按培养基生产配方要求分别准确称量种子罐和主发酵罐培养基各组分原料，种子发酵罐的容积为30 L，培养基装量为20 L；主发酵罐的容积为2000 L，培养基装量为1400 L，所述种子罐和主发酵罐的培养基生产配方相同，培养基按质量百分比，由如下组分组成：蔗糖0.20～0.70％、尿素0.10～0.40％、磷酸氢二钾0.40～0.80％、磷酸二氢钾0.20～0.40％、酵母膏0.02～0.06％、氯化铁0.01～0.04％、碳酸钙0.01～0.04％、硫酸镁0.05～0.20％、硫酸锰0.01～0.04％、淀粉0.30～0.80％、豆粕1.00～1.50％、黄豆0.80～1.20％、泡敌0.01～0.02％，余量为水，pH 6.0～7.0；

步骤S3：第一次灭菌；发酵培养前先对发酵设备的所有管路、种子罐、补料罐、发酵罐通高温蒸汽进行第一次灭菌消毒，灭菌温度121℃，时间20min；

步骤S4：投料；待发酵罐温度降至室温后，将称量配制好的培养基各组分原料分别投入到种子罐和发酵罐中；

步骤S5：第二次灭菌；通高温蒸汽进行第二次灭菌消毒，灭菌温度121℃，时间20 min；

步骤S6：种子罐接种；发酵条件为：温度35~38 ℃、罐压0.02～0.06 Mpa、通气比例为1:0.5~1:1、搅拌转数为150 rpm~200 rpm，发酵培养8~14 h，将一级菌种接种到种子罐，进行二级菌种培养；

步骤S7：主发酵罐接种；二级菌种扩培好后由系统控制直接通过管路接种进发酵罐中发酵生产，发酵工艺条件与步骤S6中种子罐相同；

步骤S8：发酵终点判定，发酵过程中定时对发酵液进行取样镜检，当芽孢率达90%以上时终止发酵；

步骤S9：离心积菌，通过管路将发酵好的菌液输送到高速管式离心机，离心收集菌泥，离心机转鼓内径142 mm，转鼓转速14000 r/min，通过能力2500 L/h，确保发酵液在60 min内处理完；

步骤S10：菌剂制备，离心收集到的菌泥按1:1~3的比例加入一定量的吸附剂后进行低温干燥，再通过粉碎、筛分、包装等工艺，制成高浓度菌剂，密封保存待用；

步骤S11：有益菌数检测，将高浓度菌剂取样后送化验室进行活菌数检测，以便生产微生物饲料添加剂时准确计算用量。

3.如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌SD-KC-001的发酵液的应用，其特征在于，用于制备畜禽养殖业的饲料添加剂，主要用于猪、鸡、牛等动物，使用时添加到配合饲料中均匀混合后饲喂。

4.如权利要求3所述的枯草芽孢杆菌SD-KC-001的发酵液的应用，其特征在于，所述饲料添加剂的生产方法包括如下步骤：

步骤S1：称量，按照如下饲料添加剂配方准确称量高浓度菌剂和载体、稀释剂，所述饲料添加剂配方按质量百分比：枯草芽孢杆菌SD-KC-001高浓度菌剂15~30份，麦芽糊精5~10份，蒙脱石20~35份，可溶性淀粉25~60份；

步骤S2：投料，将步骤S1称量好的原料经投料口投入提升机或真空上料机运送至混合机；

步骤S3：混合，投料完毕后根据所测定的混合均匀度确定最佳混合时间为8~10min，以确保变异系数不大于5%，经测定采用V型混合机或双锥形混合机，最佳混合时间确定为8min较适宜；

步骤S4：包装，达到混合时间后，混合机自动停机，通过自动定量包装秤，按预先设定的包装规格进行称量，计量偏差不大于3‰，定量称量后，用自动缝包机进行缝口；

步骤S5：检验、入库，包装时取样检测有益菌数达到产品标准要求，确认产品合格，入库保存。