[发明专利]筛选抗胶质瘤药物的方法和试剂盒

说明书

本发明提供筛选抗胶质瘤药物的方法和试剂盒，具体地，本发明提供一种抑制胶质瘤细胞迁移试剂的筛选方法，其包括以下步骤：(1)提供候选试剂；(2)将所述候选试剂和细胞接触，其中所述细胞表达AhR和/或IL24基因；(3)测定所述细胞中AhR和/或IL24表达量，任选地和对照组进行比较；当AhR表达量下降和/或IL24表达量升高时，则判定所述候选试剂具有抑制胶质瘤细胞迁移的效果。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体涉及抗癌药物筛选技术，更具体涉及筛选抗胶质瘤药物的方法和试剂盒。

背景技术

在所有癌症相关的病例研究中，脑和中枢神经系统肿瘤是导致癌症相关死亡的第三大原因。并且由于大脑对人体的重要作用，患病后会对患者的记忆、认知、运动等能力造成影响，严重降低患者的生活质量。在脑部肿瘤中，星形细胞瘤发病率较高，占原发性中枢神经系统肿瘤的15.1％，占原发性中枢神经系统恶性肿瘤的46.1％。其中胶质母细胞瘤最为常见，属于一种具有极高侵袭性的原发性胶质瘤，也是世界卫生组织(WHO)肿瘤恶性程度分类中的第IV级肿瘤。接受手术、化疗或放疗的胶质母细胞瘤患者的中位生存时间仅为1年左右，患者5年生存率仅为4-5％。根据临床资料，胶质母细胞瘤复发的主要原因是肿瘤细胞从原发瘤块部位向周围正常组织不断迁移，呈浸润性生长，导致肿瘤体和正常组织之间无清晰界线。在超过90％的临床治疗中，复发肿瘤生长在手术切除边缘几厘米的范围内，这也表明胶质母细胞瘤的弥漫性生长。因此胶质母细胞瘤预后差被认为与细胞向远处脑组织的迁移有关。同时也有病例显示，除颅内短距离迁移外，胶质母细胞瘤患者中也发现了肿瘤细胞向颅外转移的情况。以上证据表明遏制胶质母细胞瘤的迁移运动是治疗肿瘤，降低术后复发风险和提高疾病预后的关键因素。

因此本领域亟需有效筛选具有抑制胶质母细胞瘤迁移活性的药物的方法，提供有效抗胶质母细胞瘤的药物。

发明内容

本发明发现IL24和AhR具有抑制胶质母细胞瘤迁移的效果，基于此，本发明以AhR和IL24为靶点，提供一种筛选抑制胶质母细胞瘤迁移药物的方法。

因此，在一个方面，本发明提供一种抑制胶质瘤细胞迁移试剂的筛选方法，其包括以下步骤：

(1)提供候选试剂；

(2)将所述候选试剂和细胞接触，其中所述细胞表达AhR和/或IL24基因；

(3)测定所述细胞中AhR和/或IL24表达量，任选地和对照组进行比较；当AhR表达量下降和/或IL24表达量升高时，则判定所述候选试剂具有抑制胶质瘤细胞迁移的效果。

在一些实施方案中，如果测定的AhR表达量与对照组该数值比较降低至少0.1％，至少0.5％，至少1％，至少2％，至少3％，至少4％，至少5％，至少6％，至少7％，至少8％，至少9％，至少10％，至少11％，至少12％，至少13％，至少14％，至少15％，至少16％，至少17％，至少18％，至少19％或至少20％，则认为AhR表达量降低。

在一些实施方案中，如果测定的IL24表达量与对照组该数值比较升高至少0.1％，至少0.5％，至少1％，至少2％，至少3％，至少4％，至少5％，至少6％，至少7％，至少8％，至少9％，至少10％，至少11％，至少12％，至少13％，至少14％，至少15％，至少16％，至少17％，至少18％，至少19％或至少20％，则认为IL24表达量升高。

在一些实施方案中，对照组是指不添加候选试剂的组别。对照组中目标蛋白(AhR和/或IL24)正常表达，例如可将所述候选试剂替换成溶剂(包括DMSO、PBS溶液等)或其它不影响细胞AhR和/或IL24表达的试剂。

在一些实施方案中，所述筛选方法在人或非人动物体内或体外进行。

在一些实施方案中，在步骤(3)中，采用RT-PCR和/或Elisa法检测细胞中AhR和/或IL24表达量。