[发明专利]微筛选装置、方法和产品

权利要求书

1.一种用于筛选具有多种基因型的细胞库以获得具有用于产生目标分子的目标表型的细胞的方法，所述方法包括：

(a)用细胞库装载微腔阵列；

(b)在允许产生目标分子的条件下温育阵列；

(c)使阵列成像以识别包含具有目标表型的细胞的腔体；和

(d)通过将来自脉冲二极管激光器的电磁辐射引导至与腔体相关联的辐射吸收材料处，提取包含具有目标表型的细胞的腔体内容物，所述脉冲二极管激光器传送脉冲间隔为10至100毫秒、脉冲长度为1-10毫秒的2-20个脉冲的电磁辐射。

2.如权利要求1所述的方法，其中引导电磁辐射包括将电磁辐射施加到辐射吸收材料，以避免加热不与材料接触的腔体中的样品液体。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞在阵列中扩展。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞选自哺乳动物细胞、酵母细胞和细菌细胞。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述目标分子展示在酵母细胞或细菌细胞的表面上。

6.如权利要求4所述的方法，其中所述目标分子由酵母细胞或细菌细胞分泌。

7.如权利要求1所述的方法，还包括培养提取的腔体内容物以产生第二代细胞库，并且对第二代细胞库重复步骤(a)-(d)。

8.如权利要求1所述的方法，还包括(1)从包含目标表型的基因的细胞中提取DNA，(2)在引入基因突变的条件下扩增DNA；(3)创建包含扩增的DNA的第二代细胞库，和(4)对第二代细胞库重复步骤(a)-(d)。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述目标表型包括产生结合剂的细胞。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述结合剂是细胞表面结合剂、抗体、抗体片段、配体、小分子或受体。

11.如权利要求1所述的方法，其中所述目标分子包括具有目标发射强度和目标发射光谱中的至少一个的荧光蛋白质。

12.如权利要求11所述的方法，其中扫描包括识别发射目标发射强度和目标发射光谱中的至少一个的腔体。

13.如权利要求1所述的方法，其中目标表型是具有酶活性的蛋白质、缺乏酶活性抑制的蛋白质、以及在酶抑制剂存在下具有活性的蛋白质。

14.一种用于改造荧光蛋白质中目标性质的方法，其中所述目标性质包括发射光谱、发射强度、斯托克斯位移和吸收光谱中的至少一个，所述方法包括创建产生荧光蛋白的突变形式的细胞库，以及筛选产生具有目标性质的突变形式的细胞库，其中筛选方法包括：

(a)用细胞库装载微腔阵列；

(b)在允许产生突变形式的条件下温育阵列；

(c)使阵列成像以识别包含产生突变形式的细胞的腔体；和

(d)通过将来自脉冲二极管激光器的电磁辐射引导至与腔体相关联的辐射吸收材料处，提取包含产生突变形式的细胞的腔体的内容物，所述脉冲二极管激光器传送脉冲间隔为10至100毫秒、脉冲长度为1-10毫秒的2-20个脉冲的电磁辐射。