[发明专利]一种醇脱氢酶及其在制备度洛西汀关键中间体中的应用

说明书

本发明公开了一种来源于乳酸杆菌(Lactobacillus parafarraginis)的新型醇脱氢酶、重组菌以及其在生物催化制备度洛西汀关键中间体中的应用。所述的醇脱氢酶可不对称还原N,N‑二甲基‑3‑酮‑3‑(2‑噻吩)‑1‑丙胺或其盐和N‑甲基‑3‑酮‑3‑(2‑噻吩)‑1‑丙胺或其盐制备(S)‑N,N‑二甲基‑3‑羟基‑3‑(2‑噻吩)‑1‑丙胺和(S)‑N‑甲基‑3‑羟基‑3‑(2‑噻吩)‑1‑丙胺，较化学法具有反应条件温和、环境友好、选择性严格等优点；所述醇脱氢酶可催化100g/L底物转化反应，转化率99％，产物ee值99.5％，反应速率快，易于控制，催化水平较已有报道有显著提升，具有极大的工业化应用潜力。

技术领域

本发明涉及一种新型醇脱氢酶及应用，特别涉及一种重组醇脱氢酶、编码基因、含有该基因的重组表达载体和重组表达转化体，以及该酶或含有该酶的重组细胞为催化剂在制备度洛西汀关键中间体中的应用。

背景技术

盐酸度洛西汀(商品名)是美国由礼来公司开发的一种5-羟色胺(5-HT)及去甲肾上腺素(NE)再摄取抑制剂，对重度抑郁症、糖尿病周围神经痛、纤维肌痛综合症等均有显著治疗效果(BioorganicMedicinal Chemistry Letters 13(2003)4477-4480；Journal of Clinical Psychopharmacology 34(2014)9-16)。

度洛西汀为手性药物，其对映异构体中仅(S)-型具有明显的药理作用，合成(S)-度洛西汀的关键步骤是手性羟基的构建。目前报道的包括γ-氨基醇，γ-氯醇、β-羟基酯和β-羟基腈等在内的手性噻吩醇是引入手性羟基的重要中间体(US8673607B2，US9228213B2，US7790436B2，Bioscience Biotechnology and Biochemistry 68(2004)1481-1488，CN102643879B)，其中又以(S)-N,N-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-1-丙胺((S)-DMAA)和(S)-N-甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-1-丙胺((S)-MMAA)最具产业化价值。