[发明专利]一种同时测定血液中FT3和FT4的试剂盒及方法

说明书

本发明属于激素检测技术领域，涉及一种同时测定血液中FT3和FT4的试剂盒及方法。针对现有技术中FT3和FT4检测时所需样本体积大、样品需要衍生化处理、检测耗时长、检测精确度不高，且操作复杂、特异性低、批间差异大、灵敏度低、动态范围窄的技术问题，本申请提供一种同时测定血液中FT3和FT4的试剂盒，包括超滤装置、缓冲液、FT3和FT4混合校准品、FT3和FT4混合质控品、FT3和FT4混合稳定同位素内标液，本方案操作简便、特异性高、批间差异小、灵敏度高、动态范围宽，可满足临床对FT3和FT4检测。本申请还提供了一种同时测定血液中FT3和FT4的方法，无需衍生化处理，使检测步骤简化。

技术领域

本发明属于激素检测技术领域，具体地，涉及一种同时测定血液中FT3和FT4的试剂盒及方法。

背景技术

甲状腺是一个内分泌腺体，分泌甲状腺激素，对机体产生广泛而强烈的生理作用。三碘甲状腺原氨酸(Triiodothyronine,T3)和甲状腺素(Thyroxine,T4)是两种主要的甲状腺激素，可以促进个体生长发育，增加机体基础代谢率，提高糖、脂肪、蛋白质的氧化分解，增大耗氧、增强产热效应，此外，甲状腺激素还对中枢神经系统、心血管系统、消化系统等具有重要的生理作用。血液中约10％的T3和T4来自甲状腺，其余约90％的T3是由T4在外周组织中脱碘代谢后产生。在血液循环中，T3和T4以结合态和游离态两种形式存在，其中，绝大部分可逆性的结合在血浆蛋白上(主要为甲状腺结合球蛋白(分子量约为54K)、甲状腺素结合前白蛋白(分子量约为55K)和白蛋白(分子量约为66K))，仅极微量的T3(约0.3％) 和T4(约0.03％)呈现游离状态。游离型T3(Free T3，FT3)和游离型T4(Free T4，FT4) 可以通过细胞膜进入靶组织细胞，与细胞内的受体结合，发挥其生物学作用，是甲状腺激素发生生理效应的真正活性部分，可以确切地反应人体真实的甲状腺功能状态，而且FT3和FT4 可以作用于垂体，反馈性地调节促甲状腺激素的分泌。而结合型的甲状腺激素没有生物学作用的。此外，总T3和总T4的水平会随血浆蛋白的浓度或结合力的变化而发生改变，而FT3 和FT4的水平不受其影响，依然可以准确地反映机体甲状腺的功能状态。FT3和FT4分泌量的增加或减少均可导致甲状腺功能失调，引起内分泌代谢紊乱，因此，准确测定人体FT3和 FT4，对诊断治疗甲状腺疾病具有重要意义。

目前，临床上多采用传统的放射免疫分析法、酶联免疫吸附法、化学发光法测定血清中 FT3和FT4，如中国专利申请公布号CN110286237A，发明名称为“甲功五项化学发光检测试剂盒”，公开了一种甲功五项化学发光检测试剂盒，检测试剂盒包括包被的微孔反应板、生物素标记物、碱性磷酸酶标记物、校准品、发光底物液和清洗液；所述生物素标记物包括T4 抗原衍生物生物素标记物、T3抗原衍生物生物素标记物、TSH抗体生物素标记物、T4单克隆抗体生物素标记物和T3单克隆抗体生物素标记物；所述碱性磷酸酶标记物包括T4抗原衍生物碱性磷酸酶标记物、T3抗原衍生物碱性磷酸酶标记物、TSH配对抗体碱性磷酸酶标记物、 T4单克隆抗体碱性磷酸酶标记物和T3单克隆抗体碱性磷酸酶标记物；所述校准品包括总四碘甲状腺原氨酸校准品、总三碘甲状腺原氨酸校准品、TSH校准品、FT4校准品和FT3校准品，该方案能同时检测五项甲功指标。但操作复杂、特异性低、批间差异大、灵敏度低、动态范围窄，难以满足临床对FT3和FT4的检测要求。

鉴于以上所述对血清中FT3和FT4提取、快速检测及检测精准和检测限更低的需求，需要一种操作简单方便、无需衍生化处理、样本前处理耗时短、所需样本体积小、灵敏度高、特异性好、准确度高的FT3和FT4检测方法。

发明内容

1、要解决的问题