[发明专利]一种骨髓间充质干细胞注射液及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种骨髓间充质干细胞注射液，每100mL注射液中含有：骨髓间充质干细胞2‑8×10⁶个、异海松酸0.2‑0.5g、赤芝多糖5‑10mg、iRGD 0.5‑0.9μg、复合氨基酸5‑10g、柠檬酸钠0.3‑0.7 g、氯化钠1.2‑1.8g、余量为去离子水。本发明提供的注射液，通过在注射液中添加异海松酸、赤芝多糖、iRGD等成分有效保持注射液中骨髓间充质干细胞的活性，提高细胞的成活率。本发明还提供一种上述骨髓间充质干细胞注射液的制备方法，操作简便易于实现，便于注射液的商业化生产。本发明还提供了上述骨髓间充质干细胞注射液在治疗骨质疏松药物中的应用，本发明的注射液提高了移植前骨髓间充质干细胞的活性，保证移植后有足够活性和分化能力的细胞发挥作用，有效缓解骨质疏松的症状。

技术领域

本发明涉及干细胞领域，尤其涉及一种骨髓间充质干细胞注射液及其制备方法和应用。

背景技术

间充质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSCs)是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层。MSCs具有自我复制、自我更新、多方向分化潜能、造血支持以及免疫调控等特性。在特定的机体外分化环境下，能够诱导分化为骨、软骨、脂肪等多种组织细胞，被认为是细胞治疗技术最有希望的种子细胞之一。

骨髓间充质干细胞（Bone Mesenchymal Stem Cells, BMSCs）是来源于骨髓的间充质干细胞，骨髓间充质干细胞易于分离培养且免疫排斥弱，具有较强的自我更新以及多向分化潜能。被广泛应用于干细胞移植治疗等组织工程学。

目前普遍认为造成骨质疏松症的原因是骨组织中骨形成明显减少、骨吸收过程相对增强。而骨髓间充质干细胞的数量减少及分化能力的减弱，导致了分化为成骨细胞及骨细胞减少，使得骨组织中骨形成明显减少，进而造成骨质疏松。通过体外注射骨髓间充质干细胞，提高骨髓间充质干细胞的数量，进而提高骨组织中骨形成能力是改善骨质疏松的有效途径之一。然而移植的外源性骨髓间充质干细胞在体外保存过程中因各种保存不当易造成外源损伤，细胞存活率较低，注射液中的DMSO等辅料一方面会影响骨髓间充质干细胞的活性；另一方面，在注射至人体内后安全性无法保证，最终造成干细胞注射至体内后生物活性差，极大地阻碍了其临床应用，因此改善骨髓间充质干细胞注射液的成分，提高骨髓间充质干细胞移植效率，是改善骨髓间充质干细胞的临床应用效果需要解决的问题之一。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种骨髓间充质干细胞注射液，成分安全简单，能有效提高骨髓间充质干细胞的活性。

本发明的目的之二在于提供一种骨髓间充质干细胞注射液的制备方法。

本发明的目的之三在于提供一种骨髓间充质干细胞注射液的应用。

本发明的目的之一采用如下技术方案实现：

一种骨髓间充质干细胞注射液，每100mL注射液中含有：骨髓间充质干细胞2-8×10⁶个、异海松酸0.2-0.5g、赤芝多糖5-10mg、iRGD 0.5-0.9μg、复合氨基酸5-10g、柠檬酸钠0.3-0.7 g、氯化钠1.2-1.8g、余量为去离子水。

进一步地，每100mL注射液中含有：骨髓间充质干细胞5×10⁶个、异海松酸0.3g、赤芝多糖7mg、iRGD 0.7μg、复合氨基酸8g、柠檬酸钠0.5 g、氯化钠1.5g、余量为去离子水。

进一步地，所述骨髓间充质干细胞为传代培养的P3-P8代处于对数生长期的骨髓间充质干细胞。

进一步地，所述复方氨基酸为L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-丙氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、L-色氨酸、L-缬氨酸、L-苏氨酸、L-亮氨酸、L-蛋氨酸、L-异亮氨酸、L-苯丙氨酸、甘氨酸中的至少3种的混合。

本发明的目的之二采用如下技术方案实现：